Thermo Fisher Scientific CellSensor irf1-bla TF-1 Cell Line

Thermo Fisher Scientific CellSensor™ irf1-bla TF-1 Cell Line

Jak/Stat 신호전달 경로는 다양한 사이토카인에 대한 세포 반응에서 중요한 역할을 합니다. 그중 Jak2/Stat5 경로는 Interleukin-3 (IL-3), prolactin, erythropoietin (Epo), granulocyte-macrophage colony stimulating factor (GM-CSF)에 대한 세포 증식을 매개합니다.
JAK2 유전자 결손은 적혈구 형성 결함으로 인한 배아 치사로 이어지며, Jak2/Stat5 경로가 적혈구 생성에 중요한 역할을 함을 시사합니다.

최근 다수의 골수증식질환(MPD) 환자에서 발견된 JAK2 활성화 변이(V617F)는 Jak2/Stat5 경로가 특정 MPD 형태의 잠재적 치료 타깃이 될 수 있음을 보여줍니다. 활성화된 Stat5 전사인자는 β-casein, interferon regulatory factor-1 (irf-1) 등 여러 유전자의 프로모터 영역에 존재하는 특정 팔린드롬 DNA 서열에 결합합니다.

CellSensor™ irf1-bla TF-1 세포주는 irf-1 반응 요소의 조절하에 β-lactamase 리포터 유전자를 안정적으로 발현하는 인간 적혈구백혈병 세포주(TF-1)입니다. TF-1 세포는 GM-CSF 의존적 성장 특성을 가지며, GM-CSF–JAK2–STAT5 경로가 온전하게 유지되어 있습니다.

이 세포주는 GM-CSF를 이용한 EC50 및 Z'-factor로 검증되었으며, DMSO 농도, 세포 수, 자극 시간, 기질 로딩 시간 등 다양한 조건에서 테스트되었습니다. 또한 EPO 및 Jak Inhibitor 1에 대한 반응성도 평가되었습니다.

실험 요약

• GM-CSF 자극 후 5시간 배양, 0.5% DMSO 처리
• LiveBLAzer™-FRET B/G Substrate (CCF4-AM)로 2.5시간 반응
• 형광판 판독기로 460 nm 및 530 nm 파장에서 형광값 측정
• EPO 및 Jak Inhibitor 1 처리 시 농도별 반응비(460/530 ratio) 및 억제율 계산

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