Takara Adeno-X Tet-On 3G inducible expression system

Takara Adeno-X Tet-On 3G Inducible Expression System

Adeno-X Adenoviral System 3 (Tet-On 3G Inducible)는 가장 정밀하고 민감한 유전자 발현 제어 기능을 제공하는 최신 상용 아데노바이러스 벡터 시스템입니다. 이 시스템을 통해 유도형 발현이 상시 발현만큼 간편하며, 아데노바이러스 벡터로의 클로닝이 일반 플라스미드 클로닝처럼 쉽게 수행됩니다.

How does the Tet-On 3G inducible system work?

Tet-On 3G 전사 활성화 단백질을 발현하는 세포에, TRE3G 프로모터(PTRE3G) 하에 유전자가 삽입되어 있을 때 doxycycline(Dox)이 존재하면 GOI(gene of interest)가 고수준으로 발현됩니다.
Dox가 결합하면 Tet-On 3G 단백질이 구조적 변화를 일으켜 PTRE3G 내의 tetO 서열에 결합합니다.
Tet-On 기술은 전사를 억제하는 TetR 기반 시스템과 달리 전사를 활성화하여 낮은 기저 발현, 높은 최대 발현, 빠른 반응 속도를 제공합니다.

What makes this system so easy to use?

1. All-in-one vector:
   Tet-On 3G 전사활성화 유전자는 CMV 프로모터에 의해 발현되며 아데노바이러스 게놈의 E3 영역에 미리 클로닝되어 있습니다.
   GOI는 E1 영역의 PTRE3G 프로모터와 SV40 polyA 신호 사이에 In-Fusion HD 클로닝으로 삽입합니다.
   두 영역이 충분히 떨어져 있어 CMV 프로모터의 간섭이 최소화되며, 매우 낮은 기저 발현과 높은 유도율을 유지합니다.

2. Easy cloning:
   기존 대형 플라스미드(약 34 kb) 클로닝의 복잡성을 극복하기 위해 In-Fusion HD 클로닝 기술을 적용했습니다.
   이를 통해 아데노바이러스 플라스미드에 직접 클로닝이 가능하며, 일반 플라스미드처럼 간편하게 작업할 수 있습니다.

Lowest-ever background, highest sensitivity

두 가지 최적화된 요소의 결합으로 Tet-On 3G 시스템은 최고 성능의 유도형 발현 시스템을 제공합니다.

1. PTRE3G promoter:
   변이 도입으로 이전 세대 시스템 대비 매우 낮은 배경 발현을 구현했습니다.

2. Tet-On 3G transactivator protein:
   변이를 통해 doxycycline에 대한 감도를 크게 향상시켰습니다.
   두 요소의 결합으로 Dox 처리 후 고발현을 유도할 수 있으며, Dox 농도 조절로 발현 수준을 세밀하게 제어할 수 있습니다.
   유도 전후 최대 3,000배의 발현 차이를 얻을 수 있으며, 바이러스 투입량을 늘려 최대 발현 수준을 조정할 수 있습니다.

Unlike the leading competitor, the Adeno-X system really is easy

기존 경쟁사 시스템은 셔틀 벡터와 두 가지 E. coli 균주를 이용한 복잡한 8일 이상의 클로닝 과정이 필요하지만,
Adeno-X 시스템은 셔틀 벡터를 사용하지 않아 서브클로닝이 불필요하며, 단일 고성능 E. coli 균주(Stellar Competent Cells)가 키트에 포함되어 2–3일 내에 높은 효율로 클로닝을 완료할 수 있습니다.

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