Thermo Fisher Scientific GeneArt High-Order Genetic Assembly System

Invitrogen™ GeneArt™ High-Order Genetic Assembly System

GeneArt® High-Order Genetic Assembly System은 최대 10개의 DNA 단편(총 110 Kbp)을 하나의 벡터에 동시에, 매끄럽게 조립할 수 있는 고효율 키트입니다. 효모의 DNA 재조합 능력을 활용하여 효소 처리 없이 정밀한 DNA 결합을 구현합니다.

주요 특징

• 간편하고 강력한 조립: 최대 10개의 DNA 단편을 제한효소, 라이게이션, 재조합 부위 없이 단일 벡터에 동시에 조립
• 정밀성과 효율성: 원하는 서열, 방향으로 최대 90% 정확한 클론 생성
• 유연한 적용성: GeneArt 벡터 또는 사용자의 벡터 활용 가능
• 무료 온라인 도구 제공: Oligo Designer를 통한 실험 설계 지원
• 다양한 응용 분야: 합성생물학, 분자생물학 연구에서 DNA 조합, 추가, 삭제, 교체 등에 활용

작동 원리

본 시스템은 효모 Saccharomyces cerevisiae의 transformation-associated recombination (TAR)을 이용합니다. DNA 단편과 선형화된 벡터는 말단 상동성을 기반으로 결합되며, 상동성이 없는 경우 재조합 링크(합성 DNA 올리고뉴클레오타이드)를 사용해 연결할 수 있습니다.
최대 110 Kb, 10개의 DNA 단편까지 최적화되어 있으며, 조립 후 추가 서열이 남지 않습니다.

클론 검증

재조합 효모 클론은 간단한 10분 추출 프로토콜로 DNA를 분리하여 junction PCR 검증 및 E. coli 변환에 활용할 수 있습니다. 키트에는 효모 용해 버퍼와 글라스 비드가 포함되어 있습니다. 선택 배지는 CSM Media for Mav203 Yeast Cells(Cat# A13292)을 권장합니다.

클로닝 벡터 선택

본 시스템에는 클로닝 벡터가 포함되어 있지 않으며, 효모와 E. coli 모두에서 작동하는 shuttle vector(BAC-YAC 등)가 필요합니다.
별도로 구매 가능한 벡터:

• GeneArt® pYES1L Vector with Sapphire Technology™ (Cat# A13287)
• GeneArt® High-Order Vector Conversion Cassette (Cat# A13291)

클로닝 효율

실험 설계 지원

무료 온라인 디자인 툴을 통해:

• 실험 설계의 호환성 확인
• PCR 증폭 또는 fragment stitching용 DNA 올리고 설계
• 벡터 그래픽 및 GenBank 포맷 서열 다운로드(Vector NTI® 호환) 가능

응용 분야

• 대형 DNA 단편 조립
• 모듈형 발현 벡터 제작
• 융합 단백질 생성
• DNA 요소(제한효소 자리 등)의 추가, 삭제, 교체
• 합성생물학 및 분자생물학 연구

제품 사양

관련 제품

• GeneArt® Seamless Cloning and Assembly Kit (Cat# A13288)
• GeneArt® pYES1L Vector with Sapphire Technology™ (Cat# A13287)
• GeneArt® High-Order Vector Conversion Cassette (Cat# A13291)
• CSM Media for Mav203 Yeast Cells (Cat# A13292)