Thermo Fisher Scientific Bac-to-Bac N-His TOPO Expression System

Bac-to-Bac™ N-His TOPO™ Expression System

Bac-to-Bac baculovirus 발현 시스템은 곤충 세포에서 고수준 단백질 발현을 위한 효율적인 방법입니다. 이 시스템은 곤충 세포 내 상동 재조합 대신, E. coli 내에서 부위 특이적 전이를 통해 재조합 바이러스를 생성합니다.

주요 특징

• 유연성(Flexibility)
  N-말단 His 태그와 TEV 절단 부위를 포함하여, 니켈 결합 수지(예: Invitrogen ProBond Purification System)를 이용한 단백질 정제가 용이하며, AcTEV Protease를 사용해 native 단백질 생성 가능.

• 빠른 클로닝 및 간편한 스크리닝(Fast cloning, easy screening)
  Blunt TOPO 클로닝 기술을 사용하여 blunt-end PCR 산물을 5분 내에 pFastBac TOPO 벡터에 클로닝 가능.
  Mach1-T1R E. coli 균주를 포함하여, 배양 후 8시간 내 콜로니 시각화 가능.

• 높은 형질감염 효율(High transfection efficiency)
  차세대 ExpiFectamine Sf Transfection Reagent를 포함하여 곤충 세포에서 효율적인 DNA 형질감염이 가능.

• 시간 절약형 발현 bacmid(Time-saving expression bacmid)
  pFastBac 벡터의 발현 카세트가 DH10Bac E. coli 내 부모 bacmid와 재조합되어 발현 bacmid를 형성하며, 이를 곤충 세포에 형질감염시켜 재조합 baculovirus 입자를 생산.

• 간편한 콜로니 스크리닝(Easy colony screening)
  DH10Bac E. coli 내 lacZa 유전자가 전이 시 방해받아, 청백색 선별(blue/white selection)을 통해 재조합 콜로니 식별이 용이.

• 높은 단백질 발현(High protein expression)
  강력한 polyhedrin 프로모터를 사용하여 Sf9, Sf21, High Five 등 다양한 곤충 세포주에서 높은 수준의 단백질 발현 가능.

사양 (Specifications)

관련 링크

• TOPO 클로닝 기술 자세히 보기 ›
• ExpiFectamine Sf Transfection Reagent ›