Thermo Fisher Scientific Click-iT EdU Proliferation Assay for Microplates

Thermo Fisher Scientific Click-iT™ EdU Proliferation Assay for Microplates

Invitrogen™ Click-iT™ EdU Proliferation Assay for Microplates는 기존 BrdU 기반 방법보다 간단하고 강력한 포유류 세포 증식 측정 방법을 제공합니다. EdU(수정된 티미딘 유사체)가 새로 합성된 DNA에 통합된 후, HRP(horseradish peroxidase)가 고특이적 클릭 반응을 통해 공유 결합됩니다. 이후 HRP 기질인 Amplex UltraRed Reagent를 추가하여 형광 신호를 검출합니다. 이 방식은 높은 민감도와 신뢰성을 제공하며, 마이크로플레이트 포맷에서 세포 증식을 정량적으로 측정할 수 있습니다.

주요 특징

• 향상된 성능: HRP의 직접 결합으로 높은 감도와 정확도 확보
• 높은 재현성: 웰 간 변동이 적은 안정적인 포맷
• 간소화된 프로토콜: 시간 단축 및 간편한 절차
• 멀티플렉스 가능: 다른 세포 건강 지표와 병행 측정 가능

원리 및 장점

세포 증식 측정은 세포 건강 평가, 유전독성 분석, 항암제 효능 평가에 필수적입니다. 기존의 방사성 동위원소(³H-thymidine) 또는 BrdU 기반 방법은 DNA 변성 과정이 필요해 번거롭고 재현성이 낮았습니다.
Click-iT EdU Assay는 EdU(5-ethynyl-2´-deoxyuridine)를 세포에 처리하여 DNA 합성 중 삽입되도록 하며, EdU의 알카인 그룹과 HRP의 아자이드 그룹이 구리 촉매 클릭 반응으로 결합합니다. 이후 Amplex UltraRed Reagent가 HRP에 의해 형광 물질로 전환되어 형광 마이크로플레이트 리더기로 검출됩니다 (Ex: 568 nm / Em: 585 nm).

Amplex UltraRed Reagent는 높은 소광 계수, 우수한 양자 효율, 자가 산화 저항성을 지녀 다른 HRP 기질보다 높은 감도와 넓은 검출 범위를 제공합니다. 형광 및 흡광 측정 모두에 활용 가능합니다.

BrdU 기반 분석과 달리, 본 키트는 항체나 DNA 변성이 필요하지 않아 분석 성능 저하 요인을 제거하며, 스트렙타비딘-바이오틴 결합 단계도 필요 없어 내인성 바이오틴이 많은 세포에서도 간편하게 사용할 수 있습니다.

사양

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