Norgen AAV Purification Midi Kit

Norgen AAV Purification Midi Kit

Norgen의 AAV Purification Midi Kit는 세포 용해물 또는 세포 배양액으로부터 AAV 벡터를 빠르고 간편하게 농축 및 정제할 수 있는 키트입니다. 본 키트는 스핀 컬럼 크로마토그래피 기반으로 작동하며, Norgen의 독자적인 레진 분리 매트릭스를 사용합니다.

주요 특징 및 장점

• 세포 분획 또는 배양액 등 다양한 입력 시료에서 AAV 정제 가능
• 최대 90%의 높은 회수율
• 별도의 특수 장비 불필요
• 다양한 AAV 혈청형(AAV6, AAV9 등)에 적용 가능
• in vivo 및 in vitro 실험에 사용 가능한 고활성 AAV 생산
• Norgen의 레진 기반 스핀 컬럼 크로마토그래피 방식 적용

제품 설명

재조합 AAV 벡터는 유전자 전달 연구에 매우 유용한 도구입니다. 본 키트는 세포 용해물 및 배양액으로부터 AAV 벡터를 효율적으로 정제할 수 있도록 설계되었으며, 불순물 제거를 위한 원심분리 및 효소 소화 단계를 포함합니다. 정제된 AAV 벡터는 높은 생물학적 활성을 유지하며, 다양한 전이(transduction) 실험에 적합합니다.

AAV Purification Midi Kit 사양

사용량 및 처리 능력

• 각 스핀 컬럼은 8~45 mL의 시료(세포 펠릿, 배양액 또는 혼합 시료) 처리 가능
• 최대 50배 농축 가능
• 4개 샘플 처리 시 약 2~2.5시간 소요 (핸즈온 시간 약 1.5시간)
• 용출 부피: 1 mL

보관 조건 및 안정성

• DNase I, RNase A: -20°C 보관
• Elution Buffer O: 4°C 보관
• 기타 용액: 밀봉 상태로 실온 보관, 개봉 후 4°C 보관
• 출하일로부터 1년간 안정성 유지

구성품

참고 자료

프로토콜

• AAV Purification Midi Kit Protocol (4-8 prep)

응용 노트

• Purification of AAV Vectors Using Norgen’s AAV Mini and Midi Purification Kits

SDS

• 63300 - AAV Purification Midi Kit - SDS

FAQ (자주 묻는 질문)

Q1. 시료가 컬럼을 통과하지 않습니다.

• 원심분리 속도가 너무 낮을 수 있습니다 (1,500 × g 이상 필요).
• 스핀 시간이 부족할 경우 2분 추가 스핀합니다.
• 세포 잔여물이 컬럼을 막을 수 있으므로, 상층액만 적용하고 필요 시 0.2 µm 필터 사용을 권장합니다.

Q2. 회수율이 낮습니다.

• 결합 단계의 pH를 3.5~3.8로 조정해야 합니다.
• 시료의 초기 AAV 역가가 너무 낮을 수 있습니다.
• Elution Buffer O는 개봉 후 4°C에서 밀봉 보관해야 합니다.

Q3. 용출액에 침전물이 있습니다.

• 입력량이 과도할 경우 발생할 수 있습니다. 원심분리 후 상층액을 회수하고, 침전물은 새 컬럼으로 재처리합니다.

제품 이미지

Figure 1. In vitro transduction
AAV9 / Bovine AAV (AAV-Ca)

Figure 2. In vivo testing of AAV vector purified using the Norgen AAV Purification Kit in the mouse lung

Figure 3. Transduction of HTX cells using Norgen’s AAV Purification Mini Kit
| Purified Vector HTX Cells | Control |
|----------------------------|----------|

Figure 4. Linear Scaling of Norgen’s AAV Purification Mini Kit From 2.5 mL to 15 mL Input
Copy #
2.5 mL 10 mL 15 mL R² = 0.98
0.0E+00 ~ 6.0E+09

Figure 5. Transduction of HTX cells with different input volumes
| Mock | 2.5 mL |
|------|--------|
| 10 mL | 15 mL |

Figure 7. Linear Scaling of Norgen’s AAV Purification Midi Kit From 2 mL to 50 mL Input

Figure 8. Transduction of HTX cells with Norgen’s AAV Purification Midi Kit