Thermo Fisher Scientific Precision gRNA Synthesis Kit

Invitrogen™ Precision gRNA Synthesis Kit

Thermo Fisher Scientific의 Precision gRNA Synthesis Kit는 CRISPR-Cas9 시스템을 위한 guide RNA(gRNA)를 빠르고 효율적으로 합성할 수 있는 완전한 솔루션입니다. 본 키트를 이용하면 TrueCut™ Cas9 Protein v2와 복합체를 형성할 수 있는 전이 준비된 Cas9 RNP를 간단히 제작할 수 있습니다.
TrueCut Cas9 Protein v2와 함께 사용 시, 다양한 부착 및 부유 세포주에서 70% 이상의 절단 효율을 보이며 독성은 관찰되지 않았습니다.

제품 개요

두 개의 짧은 단일가닥 올리고(DNA)를 시작 재료로 하여, T7 프로모터가 포함된 gRNA 템플릿을 one-pot PCR로 조립합니다.
조립된 템플릿은 in vitro transcription (IVT) 반응에 사용되며, 빠른 정제 단계를 거쳐 4시간 이내에 전이 가능한 gRNA를 얻을 수 있습니다.
생성된 gRNA는 Invitrogen™ CRISPR Nuclease mRNA와 함께 공동 전이(co-transfection)할 수도 있습니다.
Cas9 단백질 및 mRNA 포맷 모두 플라스미드 조작이 필요 없으며, 고처리량 및 다중 유전자 편집에 적합합니다.

주요 특징

• 템플릿 조립 포함 4시간 이내 gRNA 합성 가능
• 높은 수율 (>10 μg) 및 농도 (>200 ng/μL)
• Cas9 단백질 및 mRNA 포맷 모두 지원
• 고처리량 및 유전체 규모의 세포 엔지니어링에 적합

How to Obtain a gRNA Sequence

CRISPR 기술을 이용한 유전체 편집에는 목표 서열에 결합하는 비암호화 guide RNA(gRNA)가 필요합니다.
gRNA는 crRNA(target-specific)와 tracrRNA(trans-activating)가 결합된 단일 전사체로 구성됩니다.
목표 서열(20 bp)은 PAM 모티프(NGG) 바로 상류에 위치해야 하며, PAM은 Cas9 결합 개시를 위한 DNA 상의 모티프입니다.
Cas9은 PAM으로부터 3염기 상류에서 이중가닥 절단(DSB)을 유도합니다.

CRISPR Search and Design Tool을 이용하면 인간 및 생쥐 유전체의 60만 개 이상의 gRNA 서열을 검색할 수 있습니다.
Invitrogen의 사전 설계된 gRNA는 유전자 knockout에 최적화되어 있으며, 각 유전자의 처음 3개 전사 엑손을 대상으로 합니다.
검색 결과에는 오프타겟 최소화, 결합 부위, 엑손 지도 등이 포함됩니다.
또한 사용자 정의 서열을 분석하여 고유한 CRISPR 서열을 설계할 수 있습니다.

How to Make gRNA

gRNA 서열을 선택한 후 다음 세 가지 옵션 중 하나를 선택할 수 있습니다.

1. TrueGuide Synthetic gRNA

   • 사전 설계된 gRNA를 선택하거나 TrueGuide gRNA Ordering Tool에 직접 업로드하여 주문

2. Precision gRNA Synthesis Kit

   • 본 제품으로 템플릿 조립 포함 4시간 이내 전이 준비된 gRNA 합성 가능

3. Genome Engineering Services

   • 맞춤형 서비스 팀이 IVT gRNA를 설계, 합성, 정제해 제공합니다.
     견적 및 주문 문의: 1-800-955-6288 x45682 또는 gemservices@thermofisher.com

제품 사양

제품 이미지

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