Thermo Fisher Scientific pENTR/SD/D-TOPO Cloning Kit, with One Shot TOP10 Chemically Competent E. coli
5분 내 directional TOPO 클로닝으로 blunt-end PCR 산물을 Gateway 시스템에 손쉽게 삽입. 90% 이상 효율로 정확한 방향성 클로닝 가능. 원핵 발현 최적화 벡터 포함. TOP10 competent cell 동봉. 연구용으로만 사용.
- 카탈로그번호
- K242020
- 카테고리
- Cloning Kits
- 판매단위
- pk
카탈로그
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Invitrogen™ pENTR™/SD/D-TOPO™ Cloning Kit (with One Shot™ TOP10 Chemically Competent E. coli)
pENTR™/SD/D-TOPO™ Cloning Kit는 효율적인 5분 클로닝 전략(TOPO™ Cloning)을 이용하여 blunt-end PCR 산물을 Gateway™ System 또는 MultiSite Gateway™ System에 directional cloning할 수 있도록 설계된 키트입니다.
Blunt-end PCR 산물은 pENTR™/SD/D-TOPO™ entry vector에 직접 복제되며(효율 90% 이상), 원핵생물 발현을 위한 upstream Shine-Dalgarno sequence를 포함하고 있습니다.
PCR 증폭 유전자의 클로닝과 선별에 필요한 모든 구성품이 포함되어 있습니다.
주요 특징
- Gateway™ 시스템 준비: 여러 vector system 간 cloned gene을 신속하게 운반
- 신속·용이: 단 5분 내 3단계로 PCR에서 Gateway™ Entry clone 완성
- 높은 효율성: 방향성 삽입으로 90% 이상 클로닝 성공
- 검증된 성능: 오랜 기간 입증된 안정적 기술
pENTR™/SD/D-TOPO™ Cloning Kit 개요
| 구분 | 항목 | 설명 |
|---|---|---|
| VECTOR | pENTR™/SD/D-TOPO™ Vector | Gateway™ System용 Directional cloning vector로 원핵생물 발현에 최적화 |
| 클로닝 방법 | Directional TOPO™ Cloning | Topoisomerase I 기반, blunt-end PCR 산물을 5분 내 벡터로 삽입 |
| COMPETENT CELLS | 두 가지 옵션 | 고효율 TOP10 또는 빠른 성장 Mach1™-T1R competent cell 중 선택 가능 |
간편한 Gateway™ System 접근
Gateway™ System에 진입하려면, 대상 유전자를 PCR 증폭 후 제공된 topoisomerase charged pENTR™/SD/D-TOPO™ vector에 추가하고 5분간 반응시킨 뒤 제공된 E. coli 세포에 형질전환하면 됩니다.
이후 생성된 Gateway™ Entry clone의 attL site를 이용해 원하는 Gateway™ Destination vector로 효율적인 재조합이 가능합니다.
최적화된 pENTR™/SD/D-TOPO™ Vector
이 벡터는 원핵생물 Gateway™ destination vector와 재조합 후 native protein 발현에 최적화된 T7 gene 10 translational enhancer와 ribosome binding site (RBS)를 포함합니다.
또한 M13 및 T7 primer sequencing site, attL recombination site, Kanamycin resistance gene, pUC origin을 포함하여 E. coli 선택 및 high-copy propagation에 유리합니다.
단순화된 Directional Cloning
PCR 세척, vector preparation 등 복잡한 DNA 조작 단계를 생략할 수 있습니다.
PCR 산물을 제공된 topoisomerase charged vector에 직접 추가하여 5분간 반응시키면 최대 90%의 directional clone을 얻을 수 있습니다.
벡터의 four-base overhang은 forward primer의 설계된 four-base sequence와 결합하여 방향성을 제공합니다.
Gateway™ Recombination Cloning 기술력
Gateway™ recombination cloning은 제한효소, ligase, subcloning, colony screening 없이 1시간 내 99% 효율로 재조합이 가능합니다.
이를 통해 다양한 expression system 간 동일한 DNA sequence를 신속히 이동시킬 수 있습니다.
선도적인 Cloning 기술
TOPO™ cloning과 Gateway™ recombination cloning은 수많은 연구자들이 사용하는 신뢰성 높은 기술로, 빠르고 효율적인 gene transfer를 지원합니다.
Kit 옵션
- 표준 cloning용 TOP10 competent cell
- 빠른 성장용 Mach1™-T1R competent cell
주의: 본 제품은 연구용으로만 사용 가능합니다.
치료 또는 진단 목적으로 동물이나 인간에 사용할 수 없습니다.
사양
| 항목 | 내용 |
|---|---|
| 클로닝 방법 | Directional TOPO™ |
| 반응 수 | 20 reactions |
| 제품 라인 | One Shot™ |
| 제품 유형 | TOPO Cloning Kit |
| 수량 | 20 Reactions |
| 벡터 | pENTR |
| Unit Size | Each |
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