
Thermo Fisher Scientific pENTR/D-TOPO Cloning Kit, with One Shot TOP10 Chemically Competent E. coli
5분 이내에 blunt-end PCR 산물을 Gateway 시스템용 vector로 직접 클로닝 가능. Topoisomerase I 기반의 Directional TOPO 클로닝 기술로 90% 이상 효율 달성. Kanamycin 저항성과 pUC origin 포함. 연구용으로만 사용.
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Invitrogen™ pENTR™/D-TOPO™ Cloning Kit (with One Shot™ TOP10 Chemically Competent E. coli)
pENTR™⁄D-TOPO™ Cloning Kit는 매우 효율적인 5분 cloning 전략(TOPO™ Cloning)을 이용하여 blunt-end PCR 생산물을 Gateway™ System 또는 MultiSite Gateway™ System에 직접 클로닝할 수 있는 제품입니다. Blunt-end PCR 생산물은 ligase 없이 90% 이상의 효율로 클로닝되며, post-PCR 절차나 restriction enzyme이 필요하지 않습니다. 이 키트는 PCR 증폭 유전자의 클로닝과 선택을 위한 모든 구성품을 제공합니다.
- Gateway™ 시스템 준비: 여러 vector system 간 cloned gene을 신속하게 운반
- 빠르고 쉬움: 단 5분 내에 3단계로 PCR에서 Gateway™ Entry clone으로
- 효율적: 올바른 방향으로 바르게 삽입하여 90% 이상 clone
- 입증된 성능: 십여 년간 검증된 안정적 성능
pENTR™⁄D-TOPO™ Cloning Kits 개요
| 항목 | 내용 | 설명 |
|---|---|---|
| Vector | pENTR™⁄D-TOPO™ Vector | Gateway™ System에 들어가는 Directional cloning vector |
| 클로닝 방법 | 직접적인 TOPO™ Cloning | Topoisomerase I 기반, 5분 이내에 blunt-end proofreading polymerase-amplified PCR 생산물을 vector로 직접 결합 |
| Competent Cells | 두 가지 옵션 | 높은 효율성 또는 빠른 성장율의 우수한 세포 kit 중 선택 가능 |
간편한 Gateway™ 시스템 접근
Gateway™ System에 들어가려면 대상 유전자를 PCR 증폭하고 제공된 topoisomerase charged pENTR™⁄D-TOPO™ vector에 추가한 후 5분간 배양하고 E. coli 세포에 변환하세요. 생성된 Gateway™ Entry clone은 attL 부위를 포함하며, 선택한 Gateway™ Destination vector로 효율적인 재조합을 수행할 수 있습니다.
최적화된 pENTR™⁄D-TOPO™ Vector
pENTR™⁄D-TOPO™ vector에는 M13 및 T7 primer sequencing site와 PCR 생산물 삽입 부위를 flanking하는 attL 재조합 부위가 있습니다. 이를 통해 clone sequence를 쉽게 검증하고 attR-containing Gateway™ destination vector와 재조합할 수 있습니다. Kanamycin 저항 유전자와 pUC origin은 E. coli 선택과 high-copy propagation에 이용됩니다.
단순화된 Directional Cloning
Directional TOPO™ 클로닝은 PCR 세척이나 vector preparation 같은 복잡한 DNA 조작 단계를 제거합니다. PCR 반응을 제공된 topoisomerase charged vector에 추가하여 5분간 배양 후 transform하면 최대 90%의 올바른 방향 삽입 클론을 얻을 수 있습니다. Vector의 four base overhang은 PCR forward primer의 four base sequence와 짝을 이루어 방향성을 제공합니다.
Gateway™ Recombination Cloning 기술
Gateway™ Recombination Cloning은 1시간 내에 99% 효율로 가역적 재조합을 수행합니다. restriction enzyme, ligase, subcloning, colony screening 또는 re-sequencing 없이 동일한 DNA sequence를 다양한 vector 간에 이동시킬 수 있어 시간과 비용을 절감합니다.
선도적인 Cloning 기술
TOPO™ Cloning과 Gateway™ Recombination Cloning은 수천만 명의 연구자들이 사용해온 검증된 기술입니다. 빠르고 간편하며 효율적인 클로닝으로 다양한 Gateway™ expression vector 간 gene transfer를 신속하게 수행할 수 있습니다.
Kit 옵션
- TOP10 competent cell: 표준 클로닝용
- Mach1™-T1R competent cell: 빠른 성장율용
이 제품은 연구용으로만 사용 가능합니다. 치료 또는 진단 목적으로 동물이나 인간에 사용할 수 없습니다.
사양
| 항목 | 내용 |
|---|---|
| 클로닝 방법 | Directional TOPO™ |
| 반응 수 | 20 reactions |
| 제품 라인 | One Shot™ |
| 제품 유형 | TOPO Cloning Kit |
| 수량 | 20 Reactions |
| 벡터 | pENTR |
| Unit Size | Each |
제품 이미지
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