
Merck PSF-TEF1-NH2-AMY-6HIS-THR - ALPHA-AMYLASE SECRETION AND 6 HIS TAG PLASMID
효모(S. cerevisiae)에서 단백질 발현을 위한 TEF1 constitutive promoter 기반 플라스미드. Alpha-amylase signal과 6xHis tag 포함으로 단백질 분비 및 정제 용이. Thrombin 절단 태그로 정제 후 tag 제거 가능. URA3 selection 사용.
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PSF-TEF1-NH2-AMY-6HIS-THR - Alpha-Amylase Secretion and 6 His Tag Plasmid
개요
이 플라스미드는 효모(Saccharomyces cerevisiae)에서 태그 단백질을 발현하도록 설계된 분자 클로닝용 플라스미드 벡터입니다.
URA3 auxotrophic selection cassette를 포함하여 URA3 결핍 효모의 양성 선택이 가능합니다.
효모는 Uracil이 제외된 최소 배지에서 성장시켜 선택됩니다.
주요 특징
- Alpha-Amylase 신호 펩타이드로 단백질 분비 유도
- N-말단 6xHis 태그 포함으로 단백질 정제 용이
- Thrombin 절단 부위로 tag 제거 가능
- 강력한 TEF1 constitutive promoter 사용
- 효모 발현용 SnapFast vector 기반
스펙 정보
| 항목 | 내용 |
|---|---|
| 형태(Form) | Buffered aqueous solution |
| 크기(Size) | 6805 bp |
| 선택 마커(Selection) | Kanamycin |
| 복제 개시점(Origin of replication) | 2Micron, pUC (500 copies) |
| 펩타이드 절단(Cleavage site) | Thrombin (LVPRGS) |
| 펩타이드 태그 위치(Tag position) | N-terminal |
| 프로모터(Promoter) | TEF1 (constitutive, yeast) |
| 리포터 유전자(Reporter gene) | None |
| 분비 신호(Secretion signal) | Alpha-amylase |
| 배송 상태(Shipping condition) | Ambient |
| 저장 온도(Storage temperature) | −20°C |
Peptide Tag 설명
플라스미드는 Alpha-Amylase(AMY) 신호 펩타이드를 포함하여 단백질이 세포질에서 분비되도록 합니다.
전이 과정에서 신호 펩타이드는 내인성 프로테아제에 의해 제거됩니다.
또한 Hexa-Histidine(6xHis) 태그(HHHHHH)를 포함하여 단백질 정제에 유리합니다.
Merck에서는 다양한 듀얼 펩타이드 태그 플라스미드를 제공하며, 각 태그는 고유한 생물학적 특성(예: 결합 친화성, 용해성, 분비능)을 가집니다.
Cleavage Tag 설명
Thrombin 절단 부위(LVPRGS)를 포함하여 정제 후 태그 제거가 가능합니다.
Thrombin은 Arg와 Gly 사이를 선호적으로 절단하며, 비특이적 절단을 최소화하기 위해 고순도의 효소 사용이 권장됩니다.
Promoter 설명
이 플라스미드는 Yeast Elongation Factor Alpha(TEF1) promoter를 사용합니다.
TEF1은 Merck에서 제공하는 효모 프로모터 중 가장 강력한 constitutive promoter이며, 유도 과정 없이 지속적인 발현이 가능합니다.
보다 약한 발현 수준을 원할 경우 TPI(강함), ADHI(중간), STE5(약함) 프로모터를 포함한 플라스미드도 제공됩니다.
Galactose 유도형 프로모터 플라스미드도 별도 문의 시 제공 가능합니다.
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