Thermo Fisher Scientific Pierce Direct IP Kit

Thermo Scientific™ Pierce™ Direct IP Kit

Thermo Scientific Pierce Direct IP Kit은 활성화된 레진을 이용하여 다양한 종(species) 및 클래스의 항체를 공유결합 방식으로 아가로스 비드에 고정화함으로써, Protein A/G 없이 면역침전(Immunoprecipitation, IP)을 수행할 수 있도록 설계된 키트입니다.
이 방법은 항체 간섭 없이 목표 단백질을 정제할 수 있으며, 항체 오염을 최소화하고, 혈청 시료에서도 비표적 면역글로불린의 공동정제를 방지합니다. 또한 마이크로원심분리(spin) 컵을 사용하여 세척 및 분리를 효율적으로 수행할 수 있습니다.

주요 특징

• 소량의 항체 사용: 단일 IP 실험에 2~10 μg의 항체만 필요
• 확장성: 100~200 μg 항체를 고정화하여 다수의 실험 수행 가능
• 항체 오염 최소화: 항체가 비드에 공유결합되어 중쇄 및 경쇄의 혼입 최소화(<5%)
• 모든 종 및 서브클래스 항체 사용 가능: Chicken IgY, Human IgE, Mouse IgM 등
• 재사용 가능한 항체 친화성 레진: 항체가 안정적으로 결합되어 여러 번 사용 가능
• 편리한 시료 처리: 스핀 컬럼을 통한 효율적 세척 및 용액 분리
• 완전 구성 키트: 세포 용해 완충액 및 50회 이상의 IP 실험에 필요한 모든 시약 포함
• 정제된 항체 필요: 항체 용액은 BSA, 젤라틴 등 안정화 단백질이 없어야 함

응용 분야

• 면역침전 후 단백질 전기영동 및 질량분석 또는 서열 분석
• 항체 중쇄/경쇄와 분자량이 유사한 단백질의 IP 및 SDS-PAGE 분석
• 비변성 조건하 단백질 IP
• Protein A/G에 결합하지 않는 항체를 이용한 IP
• 혈청 등 면역글로불린 함유 시료에서의 IP

Direct Immunoprecipitation 절차

Step 1: 항체를 아가로스 레진에 결합

정제된 항체를 인산 완충용액에서 AminoLink Plus Coupling Resin과 함께 반응시켜 항체의 리신 잔기와 레진의 알데하이드기가 반응하도록 합니다. 이 환원적 아민화 반응을 통해 항체는 안정적으로 공유결합되며, 85% 이상의 결합 효율을 보입니다.

Step 2: 면역침전 수행

준비된 항체 레진을 시료와 반응시켜 항원-항체 복합체를 형성합니다. 비결합 성분을 세척 후, 키트에 포함된 용출 완충액으로 항원을 회수합니다. 모든 과정은 스핀 컵 내에서 수행되어 용액과 레진이 효율적으로 분리됩니다.
항체 레진은 재사용이 가능하며, 항체 조각의 혼입 없이 순수한 항원 단백질만을 얻을 수 있습니다.

관련 제품

• Pierce™ Direct Magnetic IP/Co-IP Kit

제품 사양