Thermo Fisher Scientific Pierce Crosslink IP Kit

Thermo Scientific™ Pierce™ Crosslink IP Kit

Thermo Scientific Pierce Crosslink IP Kit은 전통적인 면역침강(IP) 방법에 교차결합(crosslinking) 단계를 추가하여, 항체를 Protein A/G agarose에 고정시킴으로써 항체 오염 없이 항원 단백질을 정제할 수 있도록 설계된 키트입니다.

주요 특징

• 항체 오염 제거: 항체가 agarose 비드에 비가역적으로 결합되어, 정제된 단백질과 함께 항체 중쇄·경쇄가 함께 용출되는 것을 최소화
• 간편한 확장성: 단일 IP 실험에 필요한 항체만 사용하거나, 100–200 µg 항체를 고정화하여 여러 번 사용할 수 있는 IP 친화성 수지 제작 가능
• 신뢰성 있는 분석 및 시료 처리: Pierce Spin Column을 사용하여 수지 손실을 방지하고, 용액 분리를 효율적으로 수행
• 재사용 가능한 항체 수지: 항체가 공유결합으로 고정되고, 온화한 용출 조건으로 인해 수지를 여러 번 재사용 가능
• 완전 구성 키트: 최소 50회 항체 고정화 및 IP 실험 수행에 충분한 시약과 스핀 컬럼 포함

응용 분야

• 단백질 전기영동 및 절단 후 질량분석 또는 서열 분석용 면역침강
• 항체 단편(heavy/light chain)과 분자량이 유사한 단백질의 SDS-PAGE 분석
• 비변성 조건(nondenaturing conditions)에서의 단백질 면역침강 및 후속 분석

작동 원리

Pierce Crosslink IP Kit은 항체를 Protein A/G agarose resin에 결합시킨 후, disuccinmidyl suberate (DSS)를 이용해 공유결합으로 고정화합니다. 이후 항원 단백질이 포함된 시료를 항체 수지와 반응시켜 항체-항원 복합체를 형성합니다. 세척 과정을 통해 비특이적 결합물질을 제거한 후, 항체로부터 항원을 용출 버퍼로 분리하여 정제합니다. 모든 과정은 마이크로센트리퓨지 스핀 컵에서 수행되어, 용액과 수지가 효율적으로 분리됩니다. 항체 수지는 여러 번 재사용이 가능합니다.

관련 제품

• Pierce™ Crosslink Magnetic IP/Co-IP Kit

사양