Thermo Fisher Scientific LanthaScreen STAT5 TF-1 Cell Line

Thermo Fisher Scientific LanthaScreen™ STAT5 TF-1 Cell Line

LanthaScreen™ GFP Cellular Assays는 살아 있는 세포에서 다양한 표적 단백질의 번역 후 변형(post-translational modification)을 분석할 수 있도록 설계되었습니다.
혈액세포 형성에 중요한 JAK2/STAT5 신호 경로는 GM-CSF, IL-3, EPO 등의 사이토카인에 의해 활성화되며, 이들 사이토카인은 세포 표면 수용체에 결합하여 JAK2를 활성화시키고, STAT5 단백질의 특정 티로신 잔기(Tyr-694/699)를 인산화합니다.

LanthaScreen™ STAT5 TF-1 세포주는 인간 조혈세포주로, GFP-STAT5 융합 단백질을 지속적으로 발현합니다. 이 세포주에서 JAK2/STAT5 경로는 기능적으로 유지되어 있으며, GFP-STAT5는 JAK2에 의해 유도 가능한 인산화 기질로 작용합니다.

이 세포주를 이용한 균질 면역 어세이(homogeneous immuno-assay)는 세포 용해액 내에서 GFP-STAT5의 인산화 상태를 LanthaScreen™ Terbium-anti-mouse 및 anti-phospho STAT5 [pTyr694/699] 항체 쌍을 사용하여 시간 분해 FRET(TR-FRET) 방식으로 검출합니다.
GFP-STAT5 렌티바이러스는 TF-1 세포에 도입 후 Blasticidine으로 선택되었습니다.

해당 세포주는 GFP 형광을 이용한 유세포분석(flow cytometry)으로 단일 클론을 분리하였으며, GFP-STAT5 융합 단백질의 지속적 발현을 확인하였습니다.
또한, GM-CSF를 JAK2 매개 GFP-STAT5 인산화의 작용제로 사용하여 EC50 및 Z’ 값을 검증하였으며, 세포 밀도, 자극 시간, DMSO 내성, 용해 및 평형 시간 등 다양한 실험 조건에서 성능을 평가하였습니다.

사양 (Specifications)

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