Invitrogen™

GeneArt™ Site-Directed Mutagenesis System

GeneArt™ Site-Directed Mutagenesis System은 표적 구조에서 in vitro로 3시간 내에 돌연변이를 생성하는 간편하고 편리하며 효율 높은 첨단 방법을 제공합니다. 이자세히 알아보기

GeneArt™ Site-Directed Mutagenesis System은 표적 구조에서 _in vitro_로 3시간 내에 돌연변이를 생성하는 간편하고 편리하며 효율 높은 첨단 방법을 제공합니다. 이 시스템은 인기품인 GeneTailor™ Site-Directed Mutagenesis System을 대체하며 완전히 재설계된 것으로 현재 시판되는 site-directed 돌연변이 생성 제품입니다. 이 제품은 본사의 돌연변이유발 기술을 한단계 더 끌어올립니다.

• 강력합니다. – 최대 14 Kb의 플라스미드에서 최대 12개 nucleotide를 대체, 제거, 삽입합니다.
• 효율적입니다. – 원하는 돌연변이체를 한 번에 만들 수 있습니다. 3 Kb 플라스미드에서 90% 이상의 정확성을 가집니다.
• 신속합니다. – 작업이 최소화된 간편한 프로토콜로 3시간 내에 플라스미드 DNA를 변이시킬 수 있습니다.
• 활용도가 높습니다. – 플라스미드 크기나 DNA 원천에 상관없이 사용 가능하며 특별한 벡터나 숙주 균주, 제한 영역이 필요하지 않습니다.

원하는 돌연변이체를 간편하게 생성합니다.
GeneArt™ Site-Directed Mutagenesis System은 DNA methylase의 내재적 속성과 high fidelity DNA polymerase, 재조합 효소, E. coli_의 천연 _McrBC endonuclease에 의존하여 돌연변이를 생성합니다. 간단히 원하는 돌연변이(최대 12개 nucleotides)를 프라이머에 넣고 PCR, 재조합, transformation을 하면 의도한 돌연변이만 가진 벡터를 구할 수 있습니다(최대 90% 효율). 돌연변이를 추가하는 template vector는 어느 원천에서든 분리할 수 있습니다(최대 14Kb). 완전한 구조를 생성하거나 큰 조각의 비관련 DNA를 조합하려면 GeneArt™ Seamless Cloning and Assembly Kit (cat# A13288) 또는 GeneArt™ High-Order Genetic Assembly System (cat#A13286)를 찾아보세요.

최적화된 돌연변이유발 프로토콜
GeneArt™ Site-Directed Mutagenesis System은 효율적이고 간편하게 최적화되어 있습니다. DNA 메틸화와 증폭 단계가 단일 반응으로 통합되어 in vitro DpnI digestion 단계가 필요하지 않습니다. 메틸화 및 증폭 후 증폭된 PCR 산물의 in vitro 재조합 반응 10분으로 콜로니 회수가 3∼10배 많아지며 mutagenesis efficiency이 높아집니다. 변이된 DNA를 DH5α™ E.coli cell로 최종 tranformation하면 모든 methylated parental DNA를 제거해 무결한 unmethylated mutagenesis 반응 산물만 남게됩니다. 정제 단계나 추가 digestion이 필요하지 않습니다. 다음 날 개별 콜로니를 선택해 돌연변이를 확인합니다.

사양

박테리아 또는 효모 균주DH5α

세포 유형Chemically Competent E. coli

효율90%

용도(애플리케이션)Seamless Cloning & Genetic Assembly

돌연변이 유도 기능Single-Site Mutagenesis

돌연변이 유도 영역 길이(최대)12 nucleotides

돌연변이 유형Deletions, Insertions, Substitutions

플라스미드Plasmids up to 14 kb

제품라인GeneArt™

제품 유형Site-Directed Mutagenesis System

수량16 Reactions

Unit SizeEach