Thermo Fisher Scientific GeneArt Seamless Cloning and Assembly Kit

Thermo Fisher Scientific GeneArt™ Seamless Cloning and Assembly Kit

Invitrogen™ GeneArt™ Seamless Cloning and Assembly Kit는 1~4개의 PCR 단편을 원하는 방향으로 동시에 클로닝할 수 있는 혁신적인 키트입니다. 제한효소 절단, 라이게이션 또는 재조합 부위가 필요하지 않으며, 상온에서 30분 만에 반응이 완료됩니다. 모든 구성품이 포함되어 있어 DNA 단편 조립과 E. coli 형질전환을 간편하게 수행할 수 있습니다.

주요 특징

• 속도와 간편성: 최대 4개의 DNA 단편(총 13 Kb까지)을 단일 벡터에 동시에 클로닝 가능
• 정밀도와 효율성: 최대 90%의 정확한 클론 획득, 불필요한 염기서열 삽입 없음
• 벡터 유연성: 제공된 선형 벡터 또는 사용자가 선택한 벡터 사용 가능
• 무료 온라인 도구 제공: Oligo Designer를 통한 실험 설계 지원
• 다양한 응용 분야: 합성생물학, 분자생물학, DNA 조합 및 변형 실험에 활용 가능

4개 이상의 DNA 단편 조합, 110 Kb 이상의 분자, 또는 PCR 증폭이 어려운 긴 DNA 요소를 사용하는 경우 GeneArt™ High-Order Genetic Assembly System (Cat# A13285)을 권장합니다.

간단하고 빠른 클론 생성

GeneArt™ Seamless Cloning은 두 단계로 구성됩니다:

1. 시험관 내 조립 반응
2. One Shot™ Chemically Competent TOP10 _E. coli_로 형질전환

전용 효소 혼합물이 상보적인 말단 상동성을 이용해 DNA 단편을 “무흉터(seamless)” 방식으로 결합합니다. 형질전환된 세포는 다음날 바로 분석 가능한 클론을 제공합니다. 15-bp 상동성은 PCR 증폭 시 맞춤형 올리고로 쉽게 설계할 수 있습니다.

클로닝 효율성, 유연성, 정밀성

• DNA 단편 크기: 100 bp ~ 5 Kb
• 최종 분자 크기: ≤ 13 Kb
• 단편 말단 형태(A-overhang 또는 blunt)는 효율에 영향 없음

pUC19L 벡터 기준 평균 효율:

• 5 Kb 단일 단편: 약 90%
• 1 Kb 단편 4개: 약 70%
• 2 Kb 단편 4개: 약 40%

클로닝 성공률은 삽입 서열이나 벡터 종류와 무관하며, 제한효소 절단 또는 PCR로 선형화 가능한 모든 플라스미드에 적용 가능합니다.

in silico 클로닝 설계 지원

정확한 상동성 설계는 성공적인 조립의 핵심입니다. Thermo Fisher는 무료 온라인 도구를 제공하여 다음을 지원합니다:

• 실험 설계의 호환성 검증
• PCR 증폭용 올리고 설계
• 벡터 그래픽 표현 및 GenBank 형식의 주석 서열 다운로드 (Vector NTI™ 호환)

응용 분야

이 키트는 모듈형 발현 벡터 제작, 융합 단백질 구성, 제한효소 자리 추가·삭제·치환 등 다양한 유전자 조작 실험에 활용됩니다. 합성생물학 및 분자생물학 연구에서 DNA 조합과 변형 과정을 간소화합니다.

제품 사양

제품 이미지

(이미지 없음)