Thermo Fisher Scientific Alexa Fluor 750 C5 Maleimide

Invitrogen™ Alexa Fluor™ 750 C5 Maleimide

Alexa Fluor™ 750은 633 nm 레이저 라인 또는 염료 펌프 레이저 여기에서 최적의 성능을 보이는 밝은 근적외선 형광 염료입니다. 이미징 및 유세포 분석에서 안정적인 신호 생성을 위해 사용되며, 수용성이고 pH 4~10 범위에서 pH에 영향을 받지 않습니다.
이 염료는 다양한 항체, 펩타이드, 단백질, 탐침 및 증폭 기질에 결합된 형태로도 제공됩니다.
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Maleimide 유도체의 특징

Alexa Fluor™ 750의 maleimide 유도체는 단백질, 올리고뉴클레오타이드 티오포스페이트 또는 저분자 리간드의 티올기(-SH)에 염료를 결합시키는 데 가장 널리 사용되는 도구입니다. 이로 인해 형광 밝기와 광안정성이 향상된 결합체를 얻을 수 있습니다.

주요 사양

일반적인 결합 반응 지침

• 단백질은 50–100 μM 농도로 pH 7.0–7.5의 완충용액(10–100 mM phosphate, Tris, HEPES 등)에 용해합니다.
• 이 pH 범위에서 단백질의 티올기는 높은 친핵성을 가지며, 아민기보다 선택적으로 maleimide와 반응합니다.
• 반응 전, DTT 또는 TCEP를 10배 몰 과량으로 사용하여 이황화 결합을 환원할 수 있습니다. DTT 사용 시 잔여 환원제는 투석으로 제거해야 하며, 이후 산소가 없는 조건에서 반응을 수행해야 합니다. TCEP 사용 시 이러한 조치가 필요 없습니다.
• Alexa Fluor™ maleimide는 고품질 무수 DMSO에 1–10 mM 농도로 즉시 용해하여 사용하며, 빛을 피해야 합니다.
• 단백질 용액에 10–20 몰 비율로 적가하여 실온에서 2시간 또는 4°C에서 하룻밤 반응시킵니다.
• 반응 후 남은 maleimide는 글루타티온, 머캅토에탄올 등 저분자 티올로 처리하여 제거할 수 있습니다.

결합체 정제

형광 표지된 항체는 Sephadex™ G-25, BioGel™ P-30 등의 겔 여과 컬럼을 이용해 자유 염료로부터 분리합니다. 단백질 크기에 따라 적절한 분자량 컷오프의 여재를 선택하거나 투석으로 정제할 수 있습니다.
다양한 항체 결합량에 최적화된 정제 키트도 제공합니다.

• 0.5–1 mg용: A33086
• 20–50 μg용: A33087
• 50–100 μg용: A33088

단백질 및 항체 표지 관련 자료

• Antibody Labeling Kits
• Labeling Chemistry Selection Tool
• The Molecular Probes™ Handbook, Section 1.2

맞춤형 결합 서비스

온라인 카탈로그에 원하는 제품이 없는 경우, 맞춤 항체 또는 단백질 결합체 제작 서비스를 제공합니다.
Custom Conjugation Service
Thermo Fisher Scientific은 ISO 13485:2000 인증을 보유하고 있습니다.