Thermo Fisher Scientific LightShift Chemiluminescent RNA EMSA Kit

Thermo Fisher Scientific LightShift Chemiluminescent RNA EMSA Kit

Thermo Scientific™ LightShift™ Chemiluminescent RNA EMSA Kit은 전기영동 이동도 변이 분석(EMSA)을 이용하여 RNA-단백질 상호작용을 연구하기 위한 비방사성 솔루션을 제공합니다.

주요 특징

• 고감도: 방사성 검출과 동등한 수준의 화학발광 검출
• 시간 절약: 1~5분의 노출로 X-ray 필름 현상 가능 (방사성 시스템 대비 약 16시간 단축)
• 유연한 적용: 다양한 방법으로 비오틴 표지된 RNA 프로브와 호환
• 간편한 구성: 결합 반응 및 RNA 프로브 검출을 위한 최적화된 시약 포함
• 비방사성 방식: 방사성 폐기물 처리 문제 제거

제품 설명

이 키트는 비오틴 표지 RNA 프로브와 화학발광 기질 시스템을 사용하여, 기존의 32P 동위원소 기반 방법과 유사한 감도로 RNA-단백질 복합체를 빠르고 안전하게 검출할 수 있습니다.
모든 반응 구성에 필요한 시약, RNA-단백질 상호작용 양성 대조군, 검출 시약이 포함되어 있습니다.

작동 원리

LightShift Chemiluminescent RNA EMSA Kit은 in vitro 방식으로 RNA-단백질 결합 시 전기영동 이동 패턴의 변화를 통해 상호작용을 검출합니다.
라벨된 RNA 프로브를 단백질 시료와 반응시켜 복합체를 형성한 후, 비변성 폴리아크릴아마이드 겔 전기영동을 수행합니다. RNA-단백질 복합체는 자유 RNA 프로브보다 느리게 이동하므로, 이동 거리 차이를 통해 상호작용을 시각화할 수 있습니다.
특이적 결합은 과량의 비표지 RNA를 이용한 경쟁 결합 실험으로 검증할 수 있습니다.

RNA 프로브 표지 방법

• 비오틴 표지 RNA 프로브는 상용 구매 또는 in vitro 전사 반응(run-off transcription), 3’ 말단 비오틴화, 효소적 접합 등의 방법으로 제작할 수 있습니다.
• Thermo Scientific Pierce RNA 3’ End Biotinylation Kit을 사용하여 3’ 말단 비오틴화를 수행할 수 있습니다.
• 내부 비오틴화 시 RNA 2차 구조에 영향을 줄 수 있으므로, 특정 상호작용에서는 맞춤 합성 프로브 또는 3’ 비오틴화 프로브 사용이 권장됩니다.

양성 대조군 (Positive Control)

본 키트에는 Iron Responsive Element (IRE) RNA 프로브가 양성 대조군으로 포함되어 있습니다.

• 철 결핍 조건에서는 IRP 단백질이 IRE RNA에 결합하여 ferritin 및 transferrin receptor 번역을 억제합니다.
• 철 과잉 조건에서는 결합 활성이 사라지고 단백질 번역이 진행됩니다.
• 200배 과량의 비표지 IRE RNA를 첨가하면 IRE 밴드 시프트 신호가 약 70% 감소하며, 관련 없는 RNA는 영향을 주지 않습니다.
  이 대조군은 실험 세팅, 전기영동, 전이 및 검출 과정의 적정성을 검증하는 데 유용합니다.

관련 제품

• tRNA for LightShift™ Chemiluminescent RNA EMSA Kit

사양

제품 이미지

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