Thermo Fisher Scientific pENTR/TEV/D-TOPO Cloning Kit, with One Shot TOP10 Chemically Competent E. coli

Invitrogen™ pENTR™/TEV/D-TOPO™ Cloning Kit

with One Shot™ TOP10 Chemically Competent E. coli

제품 개요

pENTR™/TEV/D-TOPO™ Cloning Kit는 고효율 5분 클로닝 전략(“TOPO™ Cloning”)을 이용하여 blunt-end PCR 산물을 Gateway™ 또는 MultiSite Gateway™ 시스템에 진입할 수 있는 벡터에 방향성 있게 클로닝합니다.
90% 이상 효율로 방향성 클로닝이 가능하며, TEV protease 절단 부위를 포함하여 발현 단백질의 N-말단 태그 제거가 가능합니다.

주요 특징

• Gateway™ System Ready: 다양한 벡터 시스템 간 유전자 이동 가능
• Fast and Easy: PCR 후 3단계, 약 5분 내 클로닝 완료
• Efficient: 90% 이상 올바른 방향으로 클로닝 성공
• Proven: 10년 이상 검증된 안정적인 성능

pENTR™/TEV/D-TOPO™ Cloning Kit 구성 및 특징

사용 방법

1. 관심 유전자를 PCR 증폭
2. PCR 산물을 topoisomerase가 충전된 pENTR™/TEV/D-TOPO™ 벡터에 직접 첨가
3. 5분간 반응 후 제공된 competent _E. coli_에 형질전환
4. 생성된 attL Gateway™ Entry 클론을 Destination 벡터와 재조합하여 사용

벡터 특성

• TEV protease 절단 부위 포함 → N-말단 태그 제거 가능
• M13 및 T7 primer 위치 포함 → 시퀀싱 검증 용이
• Kanamycin 내성 유전자 및 pUC origin 포함 → E. coli 내 고복제 가능

클로닝 기술 장점

• PCR 정제 및 벡터 준비 불필요
• 4-base overhang을 통한 방향성 결합
• Gateway™ Recombination 기술로 효율적이고 가역적인 클로닝 가능
• 제한효소, ligase, subcloning 없이 다양한 발현 벡터로 유전자 이동 가능

키트 옵션

• TOP10 competent cells: 표준 클로닝용
• Mach1™-T1R competent cells: 빠른 성장용

For Research Use Only.
Not intended for use in animal or human therapeutic or diagnostic applications.

제품 사양