Thermo Fisher Scientific GeneRacer Kit with AMV RT and TOPO TA Cloning Kit for Sequencing

Invitrogen™ GeneRacer™ Kit with AMV RT and TOPO TA Cloning™ Kit for Sequencing

GeneRacer™는 전체 길이의 5´ 및 3´ cDNA 말단을 효율적으로 증폭할 수 있는 고급 RACE (Rapid Amplification of cDNA Ends) 기술을 제공합니다.

주요 특징

• 최대 10 kb 길이의 전사체로부터 cDNA 생성 가능
• 세포당 30 copies 이하의 희귀 전사체의 5´ 말단 확보 가능
• 전체 길이의 5´ 및 3´ 말단 클로닝을 통해 완전한 cDNA 서열 구축 가능

SuperScript™ III Reverse Transcriptase (RT)를 사용하여 긴 mRNA의 5´ 말단 증폭 효율을 향상시킵니다. RNase H 부분이 변형되어 cDNA 합성 중 mRNA 절단을 방지하며, 더 높은 온도에서 안정적인 역전사가 가능하여 복잡한 템플릿의 2차 구조를 완화하고 완전한 cDNA 합성을 돕습니다.

GeneRacer™ 작동 원리

GeneRacer™ Kit는 전체 길이의 cDNA 말단을 포함하는 전사체만을 선택적으로 증폭합니다.
프로토콜은 5´ capped mRNA를 대상으로 시작하며, 캡을 제거하고 GeneRacer™ RNA Oligo를 부착합니다. 역전사 과정에서 이 RNA Oligo 서열이 cDNA에 포함되며, 완전한 역전사가 이루어진 cDNA만이 이 서열을 포함합니다. 이후 GeneRacer™ 5´ Primer와 유전자 특이적 primer를 이용한 5´ RACE PCR을 수행하여 전체 길이의 5´ cDNA 서열을 증폭합니다.

감도 및 길이

GeneRacer™ Kit는 알려진 전사 시작점을 가진 유전자의 전체 5´ cDNA 말단을 성공적으로 증폭할 수 있음을 입증했습니다. 총 RNA로부터 프로토콜을 수행하여 10 kb 길이의 긴 전사체와 세포당 약 30 copies 수준의 희귀 전사체도 증폭할 수 있습니다.

사양

제품 이미지

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