Thermo Fisher Scientific LanthaScreen TR-FRET Androgen Receptor Coactivator Assay Kit

Thermo Fisher Scientific LanthaScreen™ TR-FRET Androgen Receptor Coactivator Assay Kit

LanthaScreen™ TR-FRET Androgen Receptor Coactivator Assay Kit는 안드로겐 수용체(AR) 리간드의 작용제(coactivator recruitment agonist) 또는 길항제(agonist-dependent coactivator recruitment antagonist)를 고속으로 스크리닝할 수 있는 민감하고 재현성 높은 분석법을 제공합니다.
이 균질형 혼합-판독(homogeneous mix-and-read) 방식의 분석은 다음 구성요소를 포함합니다.

• 육중히스티딘(hexahistidine) 및 GST(glutathione-S-transferase)로 태그된 쥐 AR 리간드 결합 도메인(AR-LBD)
• 테르븀(Tb) 표지된 anti-GST 항체
• 형광(fluorescein)-표지된 공동활성화 인자 펩타이드(coactivator peptide)

Agonist Mode (작용제 모드)

작용제 모드에서는 AR-LBD를 시험 화합물에 첨가한 후, 형광-공동활성화 펩타이드와 Tb-anti-GST 항체 혼합물을 추가합니다.
실온에서 반응 후 520:495 nm의 TR-FRET 방출 비율을 계산하여, 용량-반응 곡선으로부터 화합물의 EC50 값을 산출합니다.
이 EC50은 리간드가 수용체에 결합하고, 구조적 변화를 유도하며, 공동활성화 펩타이드 결합을 촉진하는 복합적인 효과를 반영합니다.

Antagonist Mode (길항제 모드)

길항제 모드에서는 AR-LBD를 시험 화합물에 첨가한 후, DHT 작용제, 형광-공동활성화 펩타이드, Tb-anti-GST 항체 혼합물을 추가합니다.
이때 사용되는 DHT 작용제의 농도는 작용제 모드에서 결정된 EC80 농도입니다.
이 모드에서 생성된 데이터는 길항제의 억제 효과를 정량화하는 데 활용됩니다.

제품 사양