Thermo Fisher Scientific BLOCK-iT Pol II miR RNAi Expression Vector Kit

Invitrogen™ BLOCK-iT™ Pol II miR RNAi Expression Vector Kit

제품 개요

BLOCK-iT™ Pol II miR RNAi Expression Vector Kit는 전통적인 RNAi 벡터의 장점(안정적 발현 및 바이러스 전달 가능)을 유지하면서, 조직 특이적 발현과 하나의 전사체에서 다중 타깃 knockdown 기능을 제공합니다.
본 키트에 포함된 pcDNA™6.2-GW/miR 벡터는 목표 서열과 100% 상동성을 가지는 인공 miRNA를 발현하도록 설계되어 있으며, 이는 표적 mRNA 절단을 유도합니다.
이 벡터는 내인성 miRNA의 플랭킹 및 루프 서열을 포함하여 Pol II 전사체에서 인공 miRNA가 정확히 절단되도록 합니다.

주요 특징

• 강력한 발현: CMV 즉시 초기 프로모터를 사용하여 높은 수준의 발현 달성
• 유연한 클로닝 옵션: MultiSite Gateway™ 재조합을 통해 조직 특이적 또는 조절 가능한 프로모터 사용 가능
• 다양한 시스템 호환성: Lentiviral, Flp-In™, Reporter Fusion 등 다양한 Invitrogen™ DEST 벡터와 호환
• 다중 miRNA 발현: 하나의 전사체에서 여러 miRNA를 발현하여 다중 유전자 동시 knockdown 및 합성 표현형 생성 가능

작동 원리

1. BLOCK-iT™ RNAi Designer에 RefSeq accession 번호 또는 목표 서열을 입력하면, 100% 상동성을 가지는 최적화된 miRNA를 설계합니다.
2. 설계된 miRNA를 pcDNA™6.2-GW/miR 벡터에 클로닝 후 세포에 트랜스펙션하면 즉시 miRNA가 발현됩니다.
3. 발현된 miRNA는 핵 내 Drosha에 의해 처리되고, 세포질로 이동 후 Dicer에 의해 추가 가공됩니다.
4. 완성된 miRNA는 RISC 복합체에 결합하여 siRNA처럼 작용하며 목표 mRNA 절단을 유도합니다.
5. Gateway™ 재조합(BP 및 LR 반응)을 통해 다양한 DEST 벡터로 손쉽게 전환 가능하여 다양한 발현 시스템에 적용할 수 있습니다.

사양

제품 이미지

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