Thermo Fisher Scientific E. coli DNA Ligase

Invitrogen™ E. coli DNA Ligase

E. coli DNA Ligase는 β-NAD를 보조인자로 사용하여 double-stranded DNA의 3′ hydroxyl 및 5′ phosphate 말단 사이에 phosphodiester 결합을 형성하는 반응을 촉매합니다.
이 효소는 single-stranded 핵산에는 작용하지 않습니다.

주요 특징 및 용도

• 어플리케이션: Second-strand cDNA 합성
• 대체 용도: Blunt-end ligation이 필요하지 않을 때 T4 DNA Ligase 대체 가능
• 기원: λ lysogen gt4lop-11 lig_⁺ S7을 가진 _E. coli 594 _(Su⁻)_에서 정제
• 성능 및 품질 검사: Endodeoxyribonuclease, 3′ 및 5′ exodeoxyribonuclease assay, ligation efficiency 검사 완료

Unit 정의

1 unit은 최종 부피 20 μl(5′ 말단 농도 0.12 μM, 300 μg/ml)에서 16°C, 30분 내에 Hind III로 절단된 λ DNA의 50%를 ligation하는 데 필요한 효소의 양입니다.

반응 조건

• 반응 부피: 20 μl
• 반응 온도 및 시간: 16°C에서 1시간
• 반응 구성:
  • 18.8 mM Tris-HCl (pH 8.3)
  • 90.6 mM KCl
  • 4.6 mM MgCl₂
  • 3.8 mM DTT
  • 0.15 mM λ-NAD
  • 10 mM (NH₄)₂SO₄

제품 사양