Thermo Fisher Scientific Exonuclease III (200 U/μL)

Thermo Fisher Scientific Exonuclease III (200 U/μL)

Thermo Scientific™ Exonuclease III (ExoIII)는 네 가지 촉매 활성을 가진 효소입니다. 3′→5′ exodeoxyribonuclease 활성은 이중가닥 DNA(dsDNA)에 특이적으로 작용하며, 블런트 말단, 5′-오버행 또는 닉(nick)으로부터 dsDNA를 분해하여 5′-모노뉴클레오타이드를 방출하고 단일가닥 DNA(ssDNA)를 생성합니다.
3′-오버행이 네 염기 이상이거나 3′-말단에 C-잔기가 없는 경우, 단일가닥 DNA 또는 인산티오에이트 결합된 뉴클레오타이드에는 활성화되지 않습니다.

ExoIII의 3′-포스파타제 활성은 3′-말단 인산기를 제거하여 3′-OH 그룹을 생성합니다. 또한 Rnase H 활성을 통해 RNA-DNA 하이브리드의 RNA 가닥을 절단하며, apurinic/apyrimidinic 엔도뉴클레아제 활성을 통해 무염기 부위(AP site)에서 절단을 일으켜 5′-말단에 base-free deoxyribose 5′-phosphate 잔기를 생성합니다.

Highlights

• 제한효소 버퍼에서도 활성 유지

Applications

• S1 Nuclease와 함께 DNA 절편의 단방향 결실 생성
• DNA의 디데옥시 서열 분석용 단일가닥 템플릿 생성
• 부위특이적 변이유도(site-directed mutagenesis)
• PCR 산물 클로닝
• 가닥 특이적 프로브 제작

Note

ExoIII에 의한 DNA 절단 속도는 온도, 염 농도, 반응 내 DNA와 효소의 몰비에 따라 달라집니다. 최적의 반응 조건은 실험적으로 결정해야 합니다.

사양