Thermo Fisher Scientific FirstChoice RLM-RACE Kit, 1 Kit

Invitrogen™ FirstChoice™ RLM-RACE Kit

FirstChoice™ RLM-RACE Kit는 PCR 후 대개 단일 밴드를 생성하는 full-length, capped mRNA에서 cDNA를 증폭하도록 설계된 키트입니다. 기존 rapid amplification of cDNA ends (RACE) 프로토콜을 개선하여, full-length mRNA만 선택적으로 증폭하고 메시지의 5’ end 염기서열 클로닝을 용이하게 합니다.

주요 특징

• RNA에서 PCR 산물까지 하루 안에 확보 가능
• 적은 양의 transcript에서도 단일 특이 산물 회수
• 실제 메시지의 5’ 및/또는 3’ end 선택 가능
• 모든 효소 반응이 최적화되어 드문 mRNA도 검출 가능

RACE (Rapid Amplification of cDNA Ends)

5’-RACE는 메시지의 5’-end 염기서열 클로닝을 돕기 위해 개발된 PCR 기반 기술입니다. FirstChoice™ RLM-RACE Kit는 이 기본 프로토콜을 개선하여 full-length mRNA만 선택적으로 증폭합니다.

Full-length mRNA 선택 원리

RLM-RACE 절차에서는 total RNA 또는 poly(A) RNA를 CIP(calf intestinal phosphatase)로 처리하여 free 5’-phosphate를 가진 분자(rRNA, fragmented mRNA, tRNA, 오염된 genomic DNA)에서 5’-phosphate를 제거합니다. full-length mRNA는 영향을 받지 않습니다. 이후 TAP(tobacco acid pyrophosphatase) 처리를 통해 full-length mRNA의 cap 구조를 제거하고 5’-monophosphate를 남깁니다. 합성 RNA adapter가 이 RNA population에 접합되며, uncapped full-length mRNA만 adapter를 수용합니다. 이후 random-primed reverse transcription과 nested PCR을 통해 특정 transcript의 5’-end를 증폭합니다.

RNA에서 PCR까지 하루 안에

모든 효소 반응 단계가 최적화되어 있으며, PCR은 5시간 내에 시작할 수 있습니다.
키트에는 다음이 포함되어 있습니다:

• 100회 PCR 반응용 primer 및 nested RACE adapter primer
• 5’ RLM-RACE용 cDNA preparation reagent 및 효소
• Reverse transcription reagent
• Control RNA 및 primer
• 상세 매뉴얼

SuperTaq™ Thermostable Taq DNA Polymerase는 별도 구매이며, ≥1 kb 분절의 최적 증폭에는 SuperTaq-Plus 사용이 권장됩니다.
3’ RACE Adapter 및 3’ RACE Primer도 포함되어 있습니다.

사양 (Specifications)

제품 이미지

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