Merck PSF-TEF1-COOH-THR-T7-6HIS - C-TERMINAL 6 HIS AND T7 DUAL TAG YEAST PLASMID

PSF-TEF1-COOH-THR-T7-6HIS

C-terminal 6xHis and T7 Dual Tag Yeast Plasmid

개요

이 플라스미드는 효모(Saccharomyces cerevisiae) 세포에서 태그 단백질 발현을 위해 설계된 발현 벡터입니다. URA3 선택 마커를 포함하여 URA3 결손 효모에서 양성 선택이 가능합니다. 최소 배지에서 Uracil을 제외한 조건에서 효모를 배양하여 선택할 수 있습니다.

주요 특징

• 이중 태그 구성: C-말단에 T7 에피토프 태그(MASMTGGQQMG) 및 6xHis 태그(HHHHHH)를 포함
• 절단 부위: Thrombin 절단 서열(LVPRGS)을 포함하여 정제 후 태그 제거 가능
• 프로모터: TEF1 (효모 Elongation Factor Alpha) 구성적 프로모터로 강력한 발현 제공
• 선택 마커: URA3 auxotrophic selection cassette 포함

스펙 요약

태그 정보

이 플라스미드는 T7 및 6xHis 이중 태그를 제공하여 단백질 검출 및 정제에 유용합니다.

• T7 태그 서열: MASMTGGQQMG
• 6xHis 태그 서열: HHHHHH
  일부 펩타이드 태그는 소분자 친화성, 새로운 에피토프 형성, 단백질 용해성 향상 또는 분비와 같은 생물학적 특성을 부여할 수 있습니다.

절단 태그 정보

Thrombin 절단 서열(LVPRGS)은 태그와 발현 단백질 사이에 위치하여, 정제 후 태그 제거를 가능하게 합니다. Thrombin은 Arg와 Gly 사이를 우선적으로 절단하며, 비특이적 절단을 방지하기 위해 고순도의 효소 사용이 권장됩니다.

프로모터 발현 수준

TEF1 프로모터는 Merck에서 제공하는 효모 프로모터 중 가장 강력한 구성적 프로모터입니다. 유도 과정 없이 지속적으로 발현됩니다.
다른 발현 수준이 필요한 경우 다음 프로모터를 포함한 플라스미드도 제공됩니다:

• TPI: 강한 발현
• ADH1: 중간 발현
• STE5: 약한 발현
  또한, 유도성 발현이 필요한 경우 Galactose 유도 프로모터 플라스미드도 이용 가능합니다.