SCbio™ 40% Acrylamide-Bis solution(19:1)

제품군 소개

• Western Blot 실험에서 SDS-PAGE 겔 제조에 사용하는 시약입니다.
• 30% 및 40% 농도로 제공됩니다.
• Shelf life는 1년이며, 냉장 보관합니다.

제품 정보

규격

핵심 기능 및 특징

• Ready-to-use의 편의성: Acrylamide 분말을 직접 계량하고 용해하는 과정 없이 바로 사용할 수 있습니다.
• 일관된 재현성: 엄격하게 관리된 제조 공정을 통해 Acrylamide와 Bis-Acrylamide의 비율을 일정하게 유지합니다.
• 다양한 농도 제공: 실험 목적에 맞는 겔 농도를 손쉽게 조제할 수 있습니다.

사용 방법

1. 겔 제작(Gel Casting)

단백질을 크기별로 분리하는 Resolving gel을 먼저 붓고, 그 위에 샘플을 모아주는 Stacking gel을 붓습니다.

1) Resolving Gel 제작

원하는 농도(8~15%)에 맞춰 Acrylamide-Bis 용액, Tris-HCl(pH 8.8), SDS 및 증류수를 혼합합니다. 마지막에 중합 개시제인 APS와 촉매제인 TEMED를 넣고 잘 섞은 후 유리판 사이에 붓습니다.

2) Stacking Gel 제작

Resolving gel이 굳으면 상단 액체를 제거하고, 5% 농도의 Stacking gel 혼합물(Tris-HCl pH 6.8 포함)을 붓습니다. 즉시 Comb을 꽂아 웰(Well)을 만듭니다.

Tip: 겔 윗부분을 이소프로판올 또는 물로 덮어 공기를 차단하면 표면이 매끄럽게 굳습니다.

2. 샘플 준비(Sample Preparation)

1. 단백질 샘플과 BP- 5x Laemmli sample buffer(Cat No. 502L1214)를 혼합합니다.
2. 95~100°C에서 5분간 가열하여 단백질을 변성(Denaturation)시킨 후 얼음에서 급냉합니다.

3. 전기영동(Electrophoresis)

1. 굳은 겔을 전기영동 챔버에 장착하고 1X Tank Buffer를 채웁니다.
2. Comb을 제거한 웰에 준비된 샘플과 Ladder를 로딩합니다.
3. 전압을 약 100~120V로 설정합니다.
4. Blue Dye가 겔 하단에 도달할 때까지 전기영동을 진행합니다.

4. 결과 확인(Detection)

전기영동이 끝나면 겔을 분리하여 SCbio™ Coomassie NanoBlue Stain(Cat No. S4503) 용액으로 염색하거나 후속 실험을 진행합니다.

출처

• SCbio™ 30%/40% Acrylamide-Bis solution