
EXoPERT 다중 칼럼크로마토그래피 기술을 응용한 고순도 엑소좀 분리키트 Exo-i
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혈액 등 생체시료에서 엑소좀을 손상 없이 고순도로 분리하는 다중 칼럼크로마토그래피 기반 키트. 15분 내 빠른 분리 가능하며, 단백질 및 지질단백질 90% 이상 제거. 후속 연구에 적합한 고순도 엑소좀 획득용 의료기기 시약.
브랜드: EXoPERT
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Exo-i
다중 칼럼크로마토그래피 기술을 응용한 고순도 엑소좀 분리키트
1등급 의료기기(기타전처리일체형시약)으로 신고되어 혈액에서 엑소좀을 분리할 수 있습니다.
Exo-i 키트는 화학적·물리적 변형 없이 혈액 내 수용성 단백질과 지질단백질을 효과적으로 제거하여 후속 연구에 활용하기 적합합니다.
Why Exo-i
안전한 분리 / 빠른 분리 / 고순도 분리
- 안전한 분리: 엑소좀 손상 없이 분리 (1 µm / 40 nm)
- 빠른 분리: 15분 이내의 엑소좀 분리
- 고순도 분리: Apolipoprotein B, Albumin 등 수용성·지질단백질 효과적 제거
| 항목 | 측정값 단위 | 비교 항목 | 결과 |
|---|---|---|---|
| Apolipoprotein B | µg/mL | before / after | 농도 감소 |
| Albumin | µg/mL | before / after | 농도 감소 |
기술원리
다중층 크기배제 크로마토그래피
Exo-i는 칼럼 내부의 두 개층 다공성 비드를 통해 엑소좀을 분리합니다.
각 비드는 서로 다른 공극을 가지고 있으며, 복합적인 크기 배제를 통해 엑소좀 분획을 획득하고 혈장 내 간섭을 일으키는 지질단백질 및 수용성 단백질을 효과적으로 제거합니다.
(관련 논문: Scientific Reports 11.1 (2021): 1–9.)
Dual sized porous beads
- Vesicle 크기에 따른 용출 속도 차이 발생
- Fraction별 분리 결과:
| Fraction | 내용 |
|---|---|
| #7 | Large vesicle |
| #8 | Large lipoprotein |
| #9 | Exosome (30 ~ 200 nm) |
| #14 | Small lipoprotein |
| #16 | Soluble proteins |
Exo-i 사용 방법
- 칼럼에 PBS를 흘려 분리 준비
- 생체샘플(세포배양액, 혈장, 혈청 등) 500 µL 로딩
- 물방울이 떨어지지 않으면 PBS 추가
- 분획을 500 µL씩 포집
성능결과
엑소좀 관련 단백질 발현량 확인
웨스턴 블롯 결과는 폐암 세포 배양액(a)과 사람 혈장(b)에서 EV 관련 marker 단백질을 보여줍니다.
2B column 대비 비엑소좀 단백질 제거 효율이 높으며, 엑소좀 관련 단백질의 양을 보존합니다.
(a) Column 비교
| Marker Type | Protein Name |
|---|---|
| Exosome markers | CD63 |
| TSG101 | |
| Non-exosome markers | HSP90 (Exomere) |
| Calnexin |
(b) Fraction별 단백질 발현 (MISEV2018 기준)
| MISEV category | Protein | Fraction Numbers |
|---|---|---|
| 1a | CD9 | 7–14 |
| 1b | CD63 | 7–14 |
| 1a | CD81 | 7–14 |
| 2a | Alix | 7–14 |
| 2a | Annexin V (A5) | 7–14 |
| 2a | Annexin A1 | 7–14 |
| 2a | Flotillin-1 | 7–14 |
| 2a | TSG101 | 7–14 |
혈장 속 지질단백질 및 수용성 단백질 제거
Exo-i 칼럼을 사용하여 혈장의 엑소좀을 분리 후 ELISA 분석 결과:
| 항목 | 제거율 (%) |
|---|---|
| Apolipoprotein (지질단백질) | 91.37 |
| Albumin (수용성단백질) | 90.96 |
고순도 엑소좀 확보에 적합합니다.
농도 비교
| 항목 | Label | Concentration |
|---|---|---|
| Apolipoprotein B | before | 약 150 µg/mL |
| Apolipoprotein B | after | 약 10 µg/mL |
| Albumin | before | 약 50 mg/mL |
| Albumin | after | 약 5 mg/mL |
크기, 수득률, 순도
Nanoparticle Tracking Analysis(Nanosight)와 Small Protein 농도분포를 통해 확인한 결과:
- Fraction 11–12에서 Vesicle 크기 100–150 nm로 엑소좀 범위에 해당
- 무세포단백질 오염 최소화로 높은 순도 유지
그래프 정보 요약
| 항목 | 축 레이블 | 범위 |
|---|---|---|
| 상단 그래프 | Size (nm) | 100–300 |
| 하단 그래프 | Concentration (particles/mL) | 0E+0–4E+8 |
| 하단 그래프 (우측축) | Concentration (µg/mL) | 0–1500 |
| X축 | Fraction # | 8–15 |
논문 및 관련 문서
- "Early-stage lung cancer diagnosis by deep learning-based spectroscopic analysis of circulating exosomes."
ACS Nano 14.5 (2020): 5435–5444. - "A Proteomic Approach to Understand the Clinical Significance of Acute Myeloid Leukemia–Derived Extracellular Vesicles."
Molecular & Cellular Proteomics 20 (2021). - "Dual size-exclusion chromatography for efficient isolation of extracellular vesicles from human plasma."
Scientific Reports 11.1 (2021): 1–9. - "GCC2 as a New Early Diagnostic Biomarker for Non-Small Cell Lung Cancer."
Cancers 13.21 (2021): 5482.
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