Thermo Fisher Scientific Alexa Fluor 546 C5 Maleimide

Invitrogen™ Alexa Fluor™ 546 C5 Maleimide

Alexa Fluor™ 546은 488 nm 또는 532 nm 레이저선으로 여기되는 밝은 오렌지 형광 염료입니다. 이미징 및 유세포 분석에서 안정적인 신호 생성을 위해 사용되며, pH 4~10 범위에서 수용성과 pH 비의존성을 유지합니다.
이 염료는 항체, 펩타이드, 단백질, 트레이서, 증폭 기질 등에 결합된 다양한 형태로 제공됩니다.
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Maleimide 유도체 특징

Alexa Fluor™ 546의 maleimide 유도체는 단백질, 올리고뉴클레오타이드 티오포스페이트 또는 저분자 리간드의 티올기(-SH)에 염료를 결합시키는 데 널리 사용됩니다. 결과물은 유사 스펙트럼 형광체보다 더 밝고 광안정성이 우수합니다.

상세 정보

일반적인 결합 반응 (Typical Conjugation Reaction)

• 단백질은 50–100 μM 농도로 pH 7.0–7.5의 완충용액(10–100 mM phosphate, Tris, HEPES)에 용해합니다.
• 이 pH 범위에서 단백질의 티올기는 높은 반응성을 가지며, 아민기는 양성자화되어 반응성이 낮습니다.
• 반응 전 DTT 또는 TCEP를 사용해 이황화 결합을 환원합니다. DTT 사용 시 과량 제거 후 산소가 없는 조건에서 반응해야 하며, TCEP 사용 시 이러한 조치가 필요 없습니다.
• Maleimide 염료는 DMSO에 1–10 mM 농도로 녹여 사용 직전에 준비하고, 빛을 차단해야 합니다.
• 단백질 용액에 염료 용액을 점적하며 10–20 mol 비율로 첨가 후 실온에서 2시간 또는 4°C에서 하룻밤 반응시킵니다.
• 남은 반응성 시약은 글루타티온, 머캅토에탄올 등의 저분자 티올로 처리하여 제거합니다.

결합체 정제 (Conjugate Purification)

표지된 항체는 Sephadex™ G-25, BioGel™ P-30 등의 겔 여과 컬럼을 사용해 자유 염료로부터 분리합니다.
단백질 크기에 따라 적절한 분자량 컷오프를 선택하거나 투석으로 정제할 수 있습니다.

관련 제품:

• Antibody Conjugate Purification Kit (0.5–1 mg): A33086
• Antibody Conjugate Purification Kit (20–50 μg): A33087
• Antibody Conjugate Purification Kit (50–100 μg): A33088

단백질 및 항체 표지 관련 자료

Molecular Probes™의 다양한 항체 및 단백질 표지 키트를 제공합니다.
Antibody Labeling Kits
Labeling Chemistry Selection Tool
자세한 내용은 The Molecular Probes™ Handbook의 Kits for Labeling Proteins and Nucleic Acids—Section 1.2 참고.

맞춤형 결합 서비스

온라인 카탈로그에서 원하는 제품을 찾을 수 없는 경우, 맞춤 항체 또는 단백질 결합 서비스를 제공합니다.
Custom Conjugation Service
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