Thermo Fisher Scientific BACE1 (β-Secretase) FRET Assay Kit, red

Thermo Fisher Scientific BACE1 (β-Secretase) FRET Assay Kit, red

BACE1 (β-secretase)는 알츠하이머병(AD)의 extracellular amyloid plaques에 존재하는 Amyloid beta-peptides (Abeta) 생성에 관여하는 핵심 효소입니다. 일부 AD 조기 발현은 amyloid precursor protein (APP)의 “Swedish” mutation에 의해 설명되며, 이 변이는 BACE1에 의한 절단을 크게 증가시킵니다. 이러한 병리학적 근거로 BACE1과 γ-secretase를 억제하는 치료제 개발이 활발히 진행되고 있습니다.

본 BACE1 FRET Assay Kit는 잠재적 BACE1 억제제를 민감하고 효율적으로 스크리닝하기 위한 분석 도구로, “Swedish” mutant를 기반으로 정제된 baculovirus-expressed BACE1와 새로운 red FRET peptide 기질을 사용합니다.

주요 특징

• 성분 간섭을 줄이는 적색 방출
• 545 nm에서 여기, 585 nm에서 방출 판독
• 용액상에서 신속하고 균일하게 수행 가능
• High-throughput screening(HTS)에 적합한 포맷
• 결과 안정성 우수 (최대 24시간)
• 검증된 성능: Z´ = 0.67

Assay 원리

이 peptide 기질은 두 개의 fluorophore로 구성되며, fluorescent donor(rhodamine 유도체)와 quenching acceptor가 결합되어 있습니다. 두 그룹 간의 가까운 거리는 resonance energy transfer(FRET) 현상을 유발하여 donor fluorescence를 억제합니다.
BACE1 효소에 의해 기질이 절단되면 fluorophore가 quenching group으로부터 분리되어 fluorescence가 증가합니다. 이 fluorescence 증가는 proteolysis 비율과 선형적으로 상관관계를 가집니다.

BACE1 효소 정보

• 출처: 인간 BACE1의 ectodomain(아미노산 1–460)을 인코딩하는 cDNA를 baculovirus로 감염된 재조합 곤충 세포에서 발현
• 형태: proBACE1 (겉보기 분자량 55 kDa)
• N-terminal 서열: TQHGIRLPLR

성능 및 품질 검사

• 효소 순도: Coomassie Blue-stained SDS-PAGE에서 ≥90%
• 활성 기준: 25°C에서 1시간 내 5–15% 기질 절단

제품 사양

제품 이미지