Biosharp Cell Counting Kit-8(cck-8)

Cell Proliferation / Toxicity Assay Kit

Cell Counting Kit-8 (CCK-8)

Product Introduction

CCK-8 키트는 WST-8 기반의 빠르고 고감도의 세포 증식 및 세포 독성 평가용 키트입니다. WST-8은 MTT와 유사한 화합물로, 1-Methoxy PMS 존재 하에서 환원되어 오렌지색 수용성 포르마잔을 생성합니다. 세포 증식이 활발할수록 색이 짙어지며, 세포 독성이 클수록 색이 옅어집니다. 동일한 세포 조건에서는 색의 농도가 세포 수와 선형적으로 비례합니다.

Directions

1. 96웰 플레이트에 세포 현탁액을 접종합니다 (100 µL/웰).

   • 증식 실험: 약 2,000 cells/well
   • 독성 실험: 약 5,000 cells/well
   • 세포 크기 및 증식 속도에 따라 조정합니다.

2. 실험 목적에 따라 0–10 µL의 약물을 6, 12, 24 또는 48시간 동안 처리합니다.

3. 각 웰에 10 µL의 CCK-8 용액을 첨가합니다.

   • 초기 배양액이 200 µL인 경우 20 µL CCK-8 용액을 추가합니다.
   • 세포가 없는 배양액 + CCK-8을 블랭크로 설정합니다.
   • 약물 간섭이 우려될 경우, 세포 없이 배양액 + 약물 + CCK-8을 블랭크로 설정합니다.

4. 1–4시간 동안 인큐베이터에서 배양합니다.

   • 예비 실험을 통해 0.5, 1, 2, 4시간 후 측정하여 적절한 시간점을 결정합니다.

5. ELISA 리더로 450 nm에서 흡광도를 측정합니다.

   • 450 nm 필터가 없을 경우 420–480 nm 사용 가능
   • 탁도가 높은 시료는 650 nm를 참조 파장으로 사용 가능

6. OD 측정을 즉시 하지 않을 경우, 각 웰에 10 µL의 0.1 M HCl 또는 1% SDS 용액을 첨가하여 실온 암소 보관 시 24시간 내 안정 유지됩니다.

Note

1. 장시간 배양 시 96웰 플레이트 가장자리에 배지, PBS 또는 물을 추가하여 증발 방지.
2. 세포 종류와 수에 따라 배양 시간을 조정하며, 예비 실험을 통해 최적 조건을 탐색.
3. 접종 시 세포 분포가 균일하도록 자주 혼합하며, CCK-8 첨가 후 부드럽게 흔들어 혼합.
4. 탈수소효소 반응에 의존하므로, 산화·환원성 물질이 영향을 줄 경우 신선한 배지로 교체.
5. 배양액 색 변화나 pH 변동 시 신선한 배지로 교체 후 CCK-8 첨가 권장.
6. 측정 전 웰 내 기포가 없도록 주의.
7. 무균 충전 제품으로, 사용 시 생물안전작업대에서 무균 조작.
8. 실험 시 반드시 실험복과 장갑 착용.

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제품 이미지

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