
Thermo Fisher Scientific Zero Blunt TOPO PCR Cloning Kit for Sequencing, with One Shot Mach1 T1 Phage-Resistant Chemically Competent E. coli
5분 내 빠른 블런트엔드 PCR 클로닝 수행. pCR4Blunt-TOPO 벡터로 삽입 서열 수율 향상. Mach1 T1 파지 저항성 세포 포함. 최대 95% 정확 삽입 효율. 신속하고 검증된 TOPO 클로닝 기술.
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Thermo Fisher Scientific Zero Blunt TOPO PCR Cloning Kit for Sequencing
with One Shot Mach1 T1 Phage-Resistant Chemically Competent E. coli
Invitrogen™ Zero Blunt™ TOPO™ PCR Cloning Kits for Sequencing provide a highly efficient, 5-minute, one-step cloning strategy (TOPO™ Cloning) for the direct insertion of proofreading-polymerase–amplified blunt-end PCR products into a plasmid vector for sequencing.
Each kit uses the pCR™4Blunt-TOPO™ vector with specially designed sequencing primer sites that return more insert sequence and less vector sequence from each reaction.
The kit includes all necessary components to clone and select recombinant vectors containing your PCR fragment of choice.
주요 특징
- 더 많은 서열 확보: 표준 시퀀싱 프라이머 사용 시 벡터 서열은 줄이고 삽입 서열은 더 많이 확보
- 빠르고 간편함: PCR에서 클론까지 3단계, 약 5분의 실험 시간
- 높은 효율: 최대 95%의 클론에서 정확한 삽입 확보
- 검증된 기술: 10년 이상, 4000건 이상의 인용으로 신뢰성 입증
Kit 구성 및 개요
| 항목 | 내용 |
|---|---|
| Vector | pCR™4Blunt-TOPO™ Vector |
| Cloning Method | TOPO™ Cloning (Topoisomerase I 기반 5분 결합) |
| Competent Cells | One Shot™ Mach1™ T1 Phage-Resistant Chemically Competent E. coli |
| Promoters | T7, T3 |
| Selectable Markers | Ampicillin, Kanamycin |
| Quantity | 25 Reactions |
| Unit Size | Each |
pCR™4Blunt-TOPO™ Vector 특징
- M13 forward/reverse, T7, T3 프라이머 부위 포함
- 시퀀싱 프라이머와 삽입 부위 간 거리 최소화 (약 33 bp)
- LacZα-ccdB 유전자 융합으로 양성 선택 가능
- EcoRI 절단 부위 포함으로 삽입 서열 절단 용이
- In vitro 전사를 위한 T7 및 T3 프로모터 보유
클로닝 절차
- PCR 반응물을 TOPO™ 벡터에 직접 첨가
- 5분간 반응하여 결합
- 제공된 E. coli competent cells에 형질전환
→ 별도의 PCR 프라이머 설계, 벡터 준비, 후처리 과정 불필요
효율적 클로닝
- 블런트엔드 PCR 산물에 최적화
- proofreading DNA polymerase 사용 시 높은 결합 효율
- 95% 이상 삽입 정확도를 통해 스크리닝 시간 절감
Kit 옵션
| 용도 | 세포 유형 | 카탈로그 번호 |
|---|---|---|
| 일반 클로닝 | TOP10 | K2875-J10, K2875-20, K2875-40 |
| 고효율 클로닝 | TOP10 Electrocomp™ | K2880-20, K2880-40 |
| T1 파지 저항성 | DH5α-T1R | K2895-20 |
| 빠른 성장 | Mach1™-T1R | K2835-20 |
주의사항
TOPO™ 제품은 연구용으로만 사용 가능합니다.
동물 또는 인간의 치료 및 진단용으로 사용 불가합니다.
관련 링크
- Custom Vector Construction and Cloning Services
- Plasmid DNA Purification Kit Selection Guide
- PCR Reagents, Instruments, and Supplies
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