Thermo Fisher Scientific TOPO TA Cloning Kit for Sequencing, with One Shot MAX Efficiency DH5α-T1^R E. coli, 25 Reactions

Thermo Fisher Scientific TOPO™ TA Cloning™ Kit for Sequencing

with One Shot™ MAX Efficiency™ DH5α-T1R E. coli (25 Reactions)

Invitrogen™ TOPO™ TA Cloning™ Kits for Sequencing은 빠르고 효율적인 5분 원스텝 클로닝 전략(TOPO™ Cloning)을 제공하여, Taq polymerase로 증폭된 PCR 산물을 직접 플라스미드 벡터에 삽입할 수 있습니다. 본 키트는 더 많은 인서트 서열과 적은 벡터 서열을 얻을 수 있도록 설계된 pCR™4-TOPO™ TA 벡터를 사용합니다.

주요 특징

• 더 많은 서열 확보: 표준 시퀀싱 프라이머 사용 시 인서트 서열을 더 많이, 벡터 서열은 더 적게 확보
• 간편한 절차: PCR 후 3단계만으로 5분 내 클로닝 가능
• 높은 효율성: 최대 95%의 클론이 올바른 인서트를 포함
• 검증된 기술: 10년 이상, 4000건 이상의 인용으로 신뢰성 입증

키트 구성 및 특징

TOPO™ TA Cloning™ Kits for Sequencing Kit Overview

• Vector: pCR™4-TOPO™ TA Vector – 향상된 시퀀싱 결과를 위한 최적화 벡터
• Cloning Method: TOPO™ TA Cloning – Topoisomerase I 기반의 5분 리게이션 (3´A 오버행 PCR 산물용)
• Competent Cells: 다양한 선택 가능 (일반형, 고효율형, T1 내성형, 빠른 성장형 등)

pCR™4-TOPO™ TA Vector – 시퀀싱 최적화

pCR™4-TOPO™ TA 벡터는 MCS를 최소화하여 시퀀싱 프라이머와 인서트 부위 간 거리를 33bp까지 단축했습니다.
M13 Forward/Reverse, T7, T3 프라이머 부위가 포함되어 있으며, 각 프라이머가 키트에 포함됩니다.

클론 선택 및 조작

• 선택 마커: Ampicillin 및 Kanamycin 내성
• 선별 시스템: LacZα-ccdB 융합 유전자를 이용한 positive selection 및 blue/white screening
• 제한효소 부위: EcoRI (클론 절단용), Sse8387I (nested deletion 생성용)
• 프로모터: T7 및 T3 프로모터로 in vitro 전사 가능

간소화된 TOPO™ 기반 클로닝

특정 서열이 포함된 프라이머, 후처리, 벡터 준비 등의 절차 없이 PCR 산물을 바로 topoisomerase-충전 벡터에 첨가 후 5분간 반응시키고, 제공된 E. coli competent cells로 형질전환하면 됩니다.

효율적인 클로닝

최대 95%의 클론이 원하는 인서트를 포함하므로, 선별해야 할 클론 수를 줄여 시간과 비용을 절약할 수 있습니다. pCR™4-TOPO™ TA 벡터는 3´T 오버행을 가지며 Taq 증폭 PCR 산물의 3´A 오버행과 효율적으로 결합합니다.

TOPO™ TA Cloning™ Kit 옵션

필요에 따라 다양한 competent cell 조합으로 선택 구매 가능합니다.

추가 옵션으로 PureLink™ Quick Plasmid Miniprep Kit (Cat. No. K4575-02)를 포함한 버전도 제공됩니다.

주의사항

TOPO™ 제품은 연구용으로만 사용 가능합니다. 동물 또는 인간의 치료 및 진단용으로 사용할 수 없습니다.

관련 링크

• Custom Vector Construction and Cloning Services
• Plasmid DNA Purification Kit Selection Guide
• PCR Reagents, Instruments, and Supplies

제품 사양