Thermo Fisher Scientific EpiJET 5-hmC and 5-mC Analysis Kit

Thermo Scientific™ EpiJET 5-hmC and 5-mC Analysis Kit

Thermo Scientific EpiJET 5-hmC and 5-mC Analysis Kit는 세 가지 고급 효소(T4 phage β-glucosyltransferase (T4 BGT), Epi MspI, Epi HpaII)를 포함합니다.
Epi MspI와 Epi HpaII는 CCGG 서열 내 내부 C 메틸화에 대한 감수성이 서로 다른 이소시조효소입니다.

• Epi MspI: 시토신, 5-메틸시토신(5-mC), 5-하이드록시메틸시토신(5-hmC)이 포함된 경우에도 DNA를 완전히 절단하지만, 5-hmC가 글루코실화되면 절단이 차단됩니다.
• Epi HpaII: 변형되지 않은 CCGG 서열만 절단합니다.

이 키트는 T4 BGT가 5-hmC 잔기에 글루코스기를 부가하여 특이적으로 변형시키는 능력과, 글루코실화된 5-hmC에 대한 Epi MspI의 민감도를 이용합니다.
T4 BGT는 높은 특이성과 완전한 글루코실화를 15분 내에 수행하도록 최적화되어 있습니다.

분석 절차는 DNA 샘플의 글루코실화 후 Epi MspI 및 Epi HpaII로 제한효소 절단을 수행하며, 절단 산물은 관심 있는 CCGG 부위를 둘러싼 프라이머 쌍을 이용한 qPCR로 분석합니다.

Highlights

• Efficient and reliable — 5-hmC 및 5-mC의 정확한 정량 분석
• Robust — 0.2 μg ~ 4 μg의 넓은 DNA 입력 범위 지원
• Fast — 전체 절차 5시간 내 완료, 오버나이트 배양 불필요

Applications

• CCGG 서열 내 5-hmC 및 5-mC의 분석 및 정량

Includes

• T4 β-glucosyltransferase, 5 U/μL
• 10X Epi Buffer
• 10X UDP–glucose
• Epi MspI
• Epi HpaII
• 5-hmC Control DNA
• 5-mC Control DNA
• Unmodified Control DNA
• Control primer 1
• Control primer 2
• Nuclease-free water
• 상세 프로토콜

Specifications