
Thermo Fisher Scientific Champion pET151 Directional TOPO Expression Kit with BL21 Star (DE3) One Shot Chemically Competent E. coli
E. coli에서 높은 단백질 발현을 위한 Directional TOPO 클로닝 키트. T7 프로모터 기반으로 빠른 클로닝(5분) 가능. BL21 Star(DE3) 세포주로 mRNA 안정성 향상 및 단백질 생산 증가. His/V5 태그 포함으로 정제 및 검출 용이.
- 카탈로그번호
- K15101
- 판매단위
- pk
카탈로그
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Invitrogen™ Champion™ pET151 Directional TOPO™ Expression Kit with BL21 Star™ (DE3) One Shot™ Chemically Competent E. coli
Champion™ pET Expression System은 E. coli_에서 매우 높은 단백질 발현 수율을 제공합니다. 발현 중 관심 단백질이 총 세포 단백질의 50% 이상에 달할 수 있습니다.
이 시스템은 Studier 연구진(1–3)에 의해 개발된 T7 발현 벡터를 기반으로 하며, T7 RNA 중합효소가 native _E. coli RNA 중합효소보다 효율적으로 작동하여 높은 수준의 발현을 달성합니다.
mRNA 안정성을 향상시키는 BL21 Star™ E. coli 균주를 사용함으로써 단백질 발현이 최대 10배까지 증가할 수 있습니다.
간편하고 효율적인 Directional TOPO™ 클로닝
Champion™ pET 발현 벡터는 topoisomerase I-activated vector로, 5분 만에 클로닝이 완료됩니다.
Directional TOPO™ Cloning 기술의 주요 장점은 다음과 같습니다:
- Proofreading 기능을 가진 PCR 효소 사용으로 유전자 오류 감소
- 90% 이상의 클론이 올바른 방향으로 삽입되어 스크리닝 시간 단축
7가지 Champion™ pET Directional TOPO™ Expression Vector가 제공되며, 모두 고수준 발현을 위한 T7_lac_ promoter를 포함합니다.
각 벡터는 단백질 검출, 정제 태그 제거, 클론 선택 및 단백질 수율 개선을 위한 다양한 옵션을 제공합니다.
Champion™ pET Directional TOPO™ vector를 사용하면 최고의 단백질 발현 수율을 기대할 수 있습니다.
예시로, lacZ 유전자의 발현 및 pET151/D-TOPO™에서 발현된 β-galactosidase 융합 단백질의 N말단 태그가 TEV protease에 의해 효율적으로 절단되는 것이 확인되었습니다.
제품 사양
| 항목 | 내용 |
|---|---|
| 구성 또는 유도성 시스템 | Inducible |
| 유도제 | IPTG |
| 프로모터 | T7, lacO |
| 제품 유형 | TOPO Expression Kit |
| 선택 제제(진핵) | None |
| 항생제 내성 (박테리아) | Ampicillin (AmpR) |
| 박테리아 또는 효모 균주 | BL21 Star™ (DE3) |
| 분열 | TEV Protease Recognition Site |
| 발현 시스템 | E. coli |
| 발현 메커니즘 | Cell-Based Expression |
| 단백질 태그 | His Tag (6x), V5 Epitope Tag |
| 클로닝 방법 | Directional TOPO |
| 수량 | 20 reactions |
| 벡터 | pET |
| 제품 라인 | One Shot™ |
| Unit Size | Each |
참고 문헌
- Studier, F.W. et al. (1990) Methods Enzymol. 185:60–89
- Studier, F.W. et al. (1991) J. Mol. Biol. 219:37–44
- Rosenberg, A.H. et al. (1987) Gene 56:125–135
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