Invitrogen™

Champion™ pET151 Directional TOPO™ Expression Kit with BL21 Star™ (DE3) One Shot™ Chemically Competent E. coli

Champion™ pET Expression System은 E. coli에서 최고 수준의 단백질 수율을 제공합니다. 발현 중 관심 단백질이 총 세포 단백질의 50% 이상에자세히 알아보기

Champion™ pET Expression System은 E. coli_에서 최고 수준의 단백질 수율을 제공합니다. 발현 중 관심 단백질이 총 세포 단백질의 50% 이상에 달할 수 있습니다. 원래 Studier 연구진(1-3)이 개발한 T7 발현 vector를 기반으로 T7 RNA 중합효소가 native _E. coli RNA 중합효소보다 진화되어 있고 관심 유전자 transcription에 맞게 만들어졌기 때문에 높은 수준의 발현이 달성됩니다. mRNA transcript의 안정성을 크게 개선하고 단백질 발현을 10배까지 높이는 발현 균주 BL21 Star™ _E. coli_를 이용하여 단백질 생산이 더욱 증가됩니다.

간편하고 효율적인 Directional TOPO™ 클로닝으로
Champion™ pET 발현 vector에 빠른 시간 안에 삽입될 수 있습니다. 이들 키트는 5분 만에 클로닝이 완료되는 topoisomerase I-activated Champion™ pET 발현 vector를 포함하고 있습니다. Directional TOPO™ Cloning 기술은 다음과 같은 이유로 유전자 발현을 촉진합니다.

• PCR시에 proof reading 기능을 가진 효소를 사용하여 클론 유전자의 오류를 줄입니다.

• 클론의 90% 이상이 유전자 발현에 맞는 방향으로 콜로니 스크리닝을 위한 시간이 단축됩니다.

7가지 Champion™ pET Directional TOPO™ Expression Vector를 이용할 수 있습니다(그림 1 및 표 1): 각 vector에는 고수준 발현을 위해 T7_lac_ promoter 가 들어있습니다. 단백질 검출 단백질의 간편화, 정제 태그 제거, plasmid를 보유하고 있는 클론의 선택 및/또는 단백질 수율 개선을 위한 다양한 옵션을 이용할 수 있습니다.
Champion™ pET Directional TOPO™ vector를 사용하면 최고의 단백질 수율을 기대할 수 있습니다. 그림 2는 Champion™ pET Directional TOPO™ vector에서 _lac_Z 유전자의 발현을 나타냅니다. 그림 3은 pET151/D-TOPO™에서 발현되는 β-galactosidase 융합 단백질의 N 말단 태그의 TEV protease 를 사용한 효율적인 절단을 보여줍니다

사양

구성 또는 유도성 시스템Inducible

유도제IPTG

프로모터T7, lacO

제품 유형TOPO Expression Kit

선택 제제(진핵)None

항생제 내성 박테리아Ampicillin (AmpR)

박테리아 또는 효모 균주BL21 Star™(DE3)

분열TEV Protease Recognition Site

발현 시스템E. coli

발현 메커니즘Cell-Based Expression

단백질 태그His Tag (6x), V5 Epitope Tag

클로닝 방법Directional TOPO

수량20 reactions

벡터pET

제품라인One Shot™

Unit SizeEach