Thermo Fisher Scientific Sulfo-SBED Biotin Label Transfer Reagent, 10 mg

Thermo Scientific™ Sulfo-SBED Biotin Label Transfer Reagent, No-Weigh™ Format

Thermo Scientific Pierce Sulfo-SBED Biotin Label Transfer Reagent는 정제된 단백질을 표지하고, 그 단백질의 상호작용 파트너로 바이오틴 태그를 공유결합적으로 전이할 수 있는 다기능 시약입니다.

Sulfo-SBED는 Sulfo-N-hydroxysuccinimidyl-2-(6-[biotinamido]-2-(p-azido benzamido)-hexanoamido) ethyl-1,3'-dithioproprionate의 약자로, 한쪽 말단은 1차 아민에, 다른 한쪽은 다양한 단백질 작용기에 결합할 수 있는 이종이기능성 화학적 교차결합제(heterobifunctional crosslinker) 입니다.

일반적인 교차결합제와 달리, Sulfo-SBED는 바이오틴 그룹과 절단 가능한 이황화 결합 스페이서 암(disulfide spacer arm) 을 포함하고 있어, 상호작용 단백질 간의 결합 후 바이오틴 친화성 태그를 ‘bait’ 단백질에서 ‘prey’ 단백질로 전이할 수 있습니다.

이 라벨 전이(Label Transfer) 기술은 단백질 상호작용 탐색 및 결합 부위 연구에 매우 유용한 in vitro 방법으로, Sulfo-SBED를 활용한 다양한 연구 논문이 보고되고 있습니다.

Typical Protocol for Label Transfer Experiment

1. 정제된 bait 단백질(0.5–1 mL, PBS)에 용해된 Sulfo-SBED 시약 몇 μL를 첨가합니다.
2. 혼합물을 얼음 위 또는 실온에서 어둠 속에 30–120분간 반응시킵니다.
3. 남은 비반응 시약을 제거하기 위해 탈염 또는 투석을 수행합니다(약광 조건).
4. 라벨링된 bait 단백질을 세포 용해물 또는 상호작용 대상 단백질(prey)을 포함하는 용액에 첨가합니다.
5. 상호작용 복합체가 형성되면, 용액을 365 nm 자외선에 몇 분간 노출합니다.
6. 생성물을 다음 방법 중 하나로 분석합니다:
   • Western Blotting: DTT로 교차결합을 절단하고 SDS-PAGE로 분리 후, streptavidin-HRP로 바이오틴화된 밴드를 검출
   • 정제 및 질량분석/서열분석: 트립신 소화 후 바이오틴화된 단백질 또는 펩타이드를 친화정제로 분리하고 MS 또는 서열 분석 수행

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