Thermo Fisher Scientific GeneSwitch Mammalian Expression Kit, complete kit

Invitrogen™ GeneSwitch™ Mammalian Expression Kit (Complete Kit)

제품 개요

GeneSwitch™ Mammalian Expression System은 매우 낮은 기저 발현 수준에서 유도 가능한 포유류 세포 발현을 제공하는 시스템입니다. 실험자가 원하는 시점에 mifepristone을 통해 발현을 조절할 수 있어, 정밀한 유전자 발현 제어가 필요한 연구에 적합합니다.

시스템 작동 원리

pGene/V5-His 벡터는 최소 프로모터인 GAL4-E1b를 포함하며, 이는 효모 Gal4 DNA 결합 단백질의 결합 부위와 Adenovirus E1b 프로모터의 TATA 서열로 구성되어 있습니다.
추가적인 인자가 없을 경우 GAL4-E1b 프로모터는 전사적으로 비활성 상태를 유지합니다.

전사를 활성화하려면 pSwitch 벡터의 최소 TK 프로모터에서 발현되는 GeneSwitch™ 조절 단백질이 필요합니다. 이 단백질은 다음 3개의 기능 도메인을 가집니다.

• Gal4 DNA Binding Domain (Gal4-DBD): GAL4-E1b 프로모터에 결합
• Human Progesterone Receptor Ligand Binding Domain (hPR-LBD): mifepristone 결합 시 구조적 변화 유도
• NFκB p65 Transcription Activation Domain (p65AD): 전사 활성화 기능 수행

mifepristone이 존재하지 않을 때는 hPR-LBD의 구조로 인해 전사가 억제됩니다. 그러나 mifepristone이 결합하면 GeneSwitch™ 단백질이 활성화되어 GAL4-E1b 프로모터에서 전사가 개시됩니다.

유도 후, pGene/V5-His 벡터 상의 관심 유전자가 활성화되며, pSwitch 벡터 상의 TK 프로모터도 상향 조절되어 GeneSwitch™ 단백질의 발현이 증폭됩니다. 이로 인해 발현 수준은 바이러스 프로모터에 근접할 정도로 증가할 수 있습니다.

주요 특징

• 매우 낮은 비유도 상태 발현 및 높은 유도 발현 수준 제공
• mifepristone에 의해 정밀하게 제어되는 유도성 시스템
• 자체 증폭 메커니즘을 통한 강력한 발현
• 단백질 검출 및 정제를 위한 C-말단 V5 및 6xHis 태그 포함
• Zeocin™ 저항성 유전자를 통한 효율적 선택

pGene/V5-His 벡터 구성

• V5 Epitope Tag: Anti-V5 항체로 검출 가능
• 6xHis Tag: 니켈 킬레이트 수지로 신속한 정제 및 Anti-His(C-term) 항체로 검출 가능
• Zeocin™ Resistance Gene: 포유류 세포 및 E. coli 모두에서 선택 가능

사양

제품 이미지

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