Thermo Fisher Scientific T4 DNA Ligase (1 U/μL), 100 U

Invitrogen™ T4 DNA Ligase (1 U/μL)

T4 DNA Ligase는 double-stranded DNA의 3′ hydroxyl 및 5′ phosphate 말단 사이에서 ATP를 이용해 phosphodiester 결합을 형성하는 효소입니다. 고유한 T4 DNA Ligase buffer를 사용하면 5분 내에 ligation 반응이 최적화됩니다. Single-stranded nucleic acid는 이 효소의 기질이 아닙니다.
T4 DNA Ligase Technical Bulletin을 참고할 수 있습니다.

어플리케이션

• Cloning (blunt-end 또는 cohesive-end ligation)
• linker 또는 adapter를 blunt-ended DNA에 추가

기원

• E. coli λ lysogen NM989에서 정제됨

성능 및 품질 검사

• Endodeoxyribonuclease, 3′ 및 5′ exodeoxyribonuclease assay 수행
• Ligation 효율 검사 완료

단위 정의

• 1 단위는 37°C에서 20분 동안 1 nmol의 32P-labeled pyrophosphate를 ATP로 가수분해하는 효소량
• 1 단위는 cohesive-end ligation unit 약 300개에 해당

단위 반응 조건

• 66 mM Tris-HCl (pH 7.6)
• 6.6 mM MgCl₂
• 10 mM DTT
• 66 μM ATP
• 3.3 μM 32P-labeled pyrophosphate
• 효소 0.1 mL, 37°C에서 20분 반응

사양