Thermo Fisher Scientific TOPO TA Cloning Kit for Sequencing, with One Shot TOP10 Electrocomp E. coli, 25 Reactions

Invitrogen™ TOPO™ TA Cloning™ Kit for Sequencing

with One Shot™ TOP10 Electrocomp™ E. coli (25 Reactions)

제품 개요

TOPO™ TA Cloning™ Kits for Sequencing은 5분 만에 완료되는 고효율 단일 단계 클로닝 기술(TOPO™ Cloning)을 제공합니다.
Taq polymerase로 증폭된 PCR 산물을 직접 플라스미드 벡터에 삽입하여 시퀀싱용 클론을 빠르게 제작할 수 있습니다.

주요 특징

• 더 많은 서열 확보: 표준 시퀀싱 프라이머 사용 시 insert 서열을 더 많이, vector 서열을 더 적게 얻음
• 간편한 절차: PCR에서 클론까지 단 3단계, 5분 내 처리 가능
• 높은 효율: 최대 95%의 클론이 올바른 insert 포함
• 검증된 기술: 10년 이상, 4000건 이상의 인용으로 입증된 신뢰성

Kit 구성 및 개요

• Vector: pCR™4-TOPO™ TA Vector — 시퀀싱 최적화 벡터
• Cloning Method: TOPO™ TA Cloning — Topoisomerase I 기반 5분 리가제이션
• Competent Cells: 다양한 옵션 제공 (일반, 고효율, T1 저항성, 빠른 성장형)

pCR™4-TOPO™ TA Vector 특징

• M13 Forward/Reverse, T7, T3 프라이머 사이트 포함
• 시퀀싱 프라이머 간 거리 최소화(33 bp)로 insert 서열 비율 향상
• Ampicillin 및 Kanamycin 내성 마커 포함
• LacZα-ccdB 유전자 융합으로 양성 선택 및 blue/white screening 가능
• EcoRI 및 Sse8387I 절단 부위 포함
• T7, T3 프로모터로 in vitro 전사 가능

클로닝 절차

1. PCR 산물을 topoisomerase가 충전된 TOPO™ 벡터에 직접 첨가
2. 5분간 반응
3. 제공된 TOP10 Electrocomp™ _E. coli_로 형질전환

효율 및 신뢰성

• 최대 95%의 클론이 원하는 insert 포함
• 3′T overhang을 가진 벡터로 Taq-amplified PCR 제품(3′A overhang)과 효율적 결합
• 빠르고 간단하며 재현성 높은 클로닝 성능

Kit 옵션

• General cloning: TOP10 (K4575-J10, K4575-01, K4575-40)
• High efficiency cloning: TOP10 Electrocomp™ Cells (K4580-01, K4580-40)
• T1-resistant cloning: DH5α-T1R (K4595-01, K4595-40)
• Fast growth: Mach1™-T1R Chemically Competent E. coli (K4530-20)
• 추가 옵션: PureLink™ Quick Plasmid Miniprep Kit (K4575-02) 포함 버전도 제공

주의사항

TOPO™ 제품은 연구용 전용(For Research Use Only)입니다.
동물 또는 인간의 치료 및 진단 용도로는 사용할 수 없습니다.

관련 링크

• Custom Vector Construction and Cloning Services
• Plasmid DNA Purification Kit Selection Guide
• PCR Reagents, Instruments, and Supplies

제품 사양