Thermo Fisher Scientific Pierce Crosslink Magnetic IP/Co-IP Kit

Thermo Fisher Scientific Pierce Crosslink Magnetic IP/Co-IP Kit

The Thermo Scientific™ Pierce™ Crosslink Magnetic IP/Co-IP Kit utilizes crosslinking chemistry to covalently immobilize IP antibodies onto premium-quality Protein A/G Magnetic Beads for efficient immunoprecipitation (IP) and co-immunoprecipitation (Co-IP).

By covalently attaching the antibody to the beads, target proteins or protein complexes can be eluted and analyzed without contamination from antibody fragments. The kit includes an optimized protocol and all necessary buffers and reagents for high-yield IP or Co-IP using manual or automated magnetic separation tools.

주요 특징

• Antibody-free IP: 항체가 비드에 공유결합되어 항체 단편이 시료에 혼입되지 않음
• 편리성: 자성 비드 및 모든 필수 완충용액 포함
• 신속성: 3시간 이내 교차결합 및 면역침강 완료
• 효율성: 타사 자성 비드 대비 절반의 비드로도 높은 회수율
• 호환성: Protein A/G 결합으로 대부분의 mouse 및 rabbit 항체 사용 가능
• 확장성: 단일 IP 또는 다중 실험용으로 유연하게 적용 가능

작동 원리

1. IP 항체를 Protein A/G Magnetic Beads에 결합
2. Disuccinimidyl Suberate (DSS)로 항체를 비드에 공유결합
3. 세포 용해물 또는 조직 추출물과 반응시켜 항원–항체 복합체 형성
4. 비특이적 결합 물질 세척 후, 저 pH 용출 완충액으로 항원 용출
5. 중화 완충액으로 단백질 활성 유지
6. Lane Marker Sample Buffer 포함으로 SDS-PAGE 분석 준비 용이

프로토콜 요약

1. 1X Coupling Buffer로 비드 세척
2. 항체를 Protein A/G 비드에 15분간 결합
3. 1X Coupling Buffer로 3회 세척
4. DSS로 30분간 교차결합
5. Elution Buffer 3회, IP Lysis/Wash Buffer 2회 세척
6. 세포 용해물과 1–2시간(또는 4°C에서 overnight) 반응
7. IP Lysis/Wash Buffer 2회, 정제수 1회 세척
8. 결합된 항원 용출

참고 사항

• 교차결합 방식은 항체 결합 부위 일부 손실로 항원 회수율이 다소 낮을 수 있음
• 항체량을 기존 IP보다 약간 증가시키면 최적의 결과를 얻을 수 있음
• Western blot 시 항체 밴드 간섭이 없는 깨끗한 결과 제공

관련 제품

• Pierce™ Crosslink IP Kit

제품 사양