Thermo Fisher Scientific CloneJET PCR Cloning Kit, 20 Reactions

Thermo Scientific™ CloneJET PCR Cloning Kit, 20 Reactions

Thermo Scientific CloneJET PCR Cloning Kit은 모든 내열성 DNA 중합효소로 생성된 PCR 산물의 고효율 클로닝을 위한 양성 선택 시스템입니다. 블런트 또는 스티키 엔드 DNA 절편 모두 클로닝 가능하며, 인산화 또는 비인산화 DNA 절편에도 적합합니다. 제공된 양성 선택 벡터를 이용한 라이게이션은 5분만에 완료되며, 99% 이상의 재조합 클론을 얻을 수 있습니다.

Proofreading 효소로 생성된 블런트 엔드 PCR 산물은 직접 클로닝 벡터에 라이게이션되며, 비-proofreading 효소 또는 혼합 효소로 생성된 산물은 키트에 포함된 Thermostable DNA Blunting Enzyme으로 5분간 블런팅 후 라이게이션할 수 있습니다. 생성된 라이게이션 산물은 모든 일반적인 실험실용 E. coli 균주에 직접 형질전환할 수 있습니다.

주요 특징 (Features)

• 양성 선택 벡터 pJET1.2/blunt 포함
  • DNA 삽입 시 치명적 제한효소 유전자가 불활성화되어 재조합 클론만 생존
  • 비재조합 벡터는 숙주 세포 사멸 유도 → 블루/화이트 스크리닝 불필요
• 편리한 조작성
  • 삽입 부위 양쪽에 BglII 인식 서열 존재
  • T7 프로모터 포함으로 in vitro 및 in vivo 전사 및 시퀀싱 가능

하이라이트 (Highlights)

• 빠름 — 5분 내 PCR 클로닝
• 높은 효율 — 99% 이상의 양성 클론
• 백그라운드 없음 — 양성 선택 벡터 사용
• 다용도 — 블런트 및 스티키 엔드 클로닝 모두 지원
• 경제적 — 별도의 블루/화이트 스크리닝 불필요

응용 분야 (Applications)

• 블런트 엔드 또는 3’-dA 테일 PCR 산물(최대 10 kb) 클로닝
• 제한효소로 생성된 DNA 절편 클로닝
• 클로닝 DNA 시퀀싱
• T7 프로모터 기반 in vitro 및 in vivo 전사

구성품 (Includes)

• pJET1.2/blunt Cloning Vector
• T4 DNA Ligase
• 2X Reaction Buffer
• DNA Blunting Enzyme
• pJET1.2 Forward Sequencing Primer (5'-CGACTCACTATAGGGAGAGCGGC-3')
• pJET1.2 Reverse Sequencing Primer (5'-AAGAACATCGATTTTCCATGGCAG-3')
• Control PCR Product
• Water, nuclease-free
• 상세 프로토콜

사용 시 유의사항

전기천공(electroporation) 전에는 반드시 GeneJET PCR Purification Kit #K0701 등을 이용하여 칼럼 정제하거나 클로로포름으로 단백질과 염을 제거해야 합니다. 단백질 및 염 존재 시 전기천공이 저해될 수 있습니다.

관련 제품 (Related Products)

• CloneJET PCR Cloning Kit (K1231)
• Fast DNA End Repair Kit (K0771)

사양 (Specifications)