Norgen Plasma/Serum Exosome Purification and RNA Isolation Midi Kit

Norgen Plasma/Serum Exosome Purification and RNA Isolation Midi Kit

SKU: 58500
공급업체: Norgen Biotek

제품 개요

이 키트는 혈장/혈청 시료로부터 엑소좀을 정제하고, 이어서 엑소좀 RNA를 분리하는 올인원 시스템입니다. Norgen의 독자적인 스핀 컬럼 크로마토그래피 기술을 기반으로 하며, 모든 크기의 RNA(마이크로RNA 포함)를 GC 함량과 무관하게 편향 없이 분리할 수 있습니다.

주요 특징 및 장점

• 기능적 연구를 위한 완전한 혈장/혈청 엑소좀의 정제 및 농축
• 모든 크기의 RNA(마이크로RNA 포함) 분리 가능
• 다양한 입력 시료 용량(1~4 mL)에 대응
• 페놀 추출, Proteinase K 처리, carrier RNA 불필요
• 초원심분리, 필터링, 특수 주사기 불필요
• 침전 시약 및 장시간 인큐베이션 불필요
• 대부분의 종(species)의 혈장/혈청과 호환 가능
• RNA 결합 단백질로부터 자유로운 순수 엑소좀 정제
• Norgen의 독자적인 수지(resin)를 사용한 스핀 컬럼 방식
• 정제된 RNA는 Small RNA Sequencing, RT-PCR, Northern blot 등 다양한 후속 응용에 적합

키트 구성 및 사양

* 평균 수율 및 RNA 정량 방법은 제품 설명서 4페이지 참고

저장 조건 및 안정성

모든 용액은 밀봉하여 실온에 보관하십시오.
본 키트는 출하일로부터 2년간 안정합니다.
염 침전이 관찰될 경우 Lysis Buffer A를 60°C에서 20분간 가온하십시오.

주의 사항

EDTA 또는 Citrate로 채혈된 혈액에서 얻은 신선하거나 냉동된 혈장/혈청 시료에 적합합니다.
Heparin으로 채혈된 혈장은 RT-PCR 등 후속 분석에 간섭을 일으킬 수 있으므로 사용하지 마십시오.

구성품 비교

Supporting Data

Figure 1. Isolation of RNA from exosomes purified from different plasma volumes (Mini Kit)

Norgen’s Mini Kit(Cat# 58300)을 사용하여 서로 다른 혈장 부피에서 엑소좀을 정제 후 RNA를 분리하였습니다. RT-qPCR로 miR-26a 증폭을 평가한 결과, 시료 부피가 증가할수록 Ct 값이 감소하고 회수율은 90% 이상으로 선형성을 보였습니다.

A. Avg. Ct Value of Plasma Exosomal miR-26a

B. Relative Amount of Plasma Exosomal miR-26a

Figure 2. Comparing exosome yields from different purification methods

1 mL 혈장에서 Norgen 키트, Competitor S, Competitor L을 사용하여 엑소좀을 정제 후 NanoSight LM10으로 분석하였습니다. Norgen 키트는 55 nm 엑소좀을 9.64 × 10¹³ particles/mL의 높은 회수율로 정제하였으며, 불순물이 검출되지 않았습니다.

A. Concentration (x10¹³/mL Plasma)

B. Particle Size Distribution (nm)
Competitor L / Competitor S / Norgen 비교 그래프 (주요 크기: 55, 65, 75, 185 nm)

Figure 3. NanoSight data showing intact exosomes purified from 1 mL and 10 mL plasma

• Plasma - 1 mL Input
• Plasma - 10 mL Input
  정제된 엑소좀의 수는 시료 부피에 비례하여 증가함을 확인하였습니다.

Figure 4. Isolation of RNA from exosomes purified from different plasma volumes (Midi Kit)

Norgen’s Midi Kit(Cat# 58500)을 사용하여 다양한 혈장 부피에서 엑소좀 RNA를 분리하였습니다. RT-qPCR 결과, Ct 값은 시료량 증가에 따라 감소하였으며, 회수율은 90% 이상으로 선형성을 보였습니다.

A. Avg. Ct Value of Plasma Exosomal miR-26a

B. Relative Amount of Plasma Exosomal miR-26a

Figure 5. Isolation of RNA from exosomes purified from different plasma volumes (Maxi Kit)

Norgen’s Maxi Kit(Cat# 58600)을 사용하여 다양한 혈장 부피에서 엑소좀 RNA를 정제하였습니다. RT-qPCR 결과, Ct 값은 시료량 증가에 따라 감소하였으며, 회수율은 90% 이상으로 선형성을 보였습니다.

A. Avg. Ct Value of Plasma Exosomal miR-26a

B. Relative Amount of Plasma Exosomal miR-26a

문서 자료

• Protocol

  • Mini Kit (Cat# 58300)
  • Midi Kit (Cat# 58500)
  • Maxi Kit (Cat# 58600)

• Application Note

  • Small RNA Sequencing of Plasma Exosomes Collected on Heparin

• SDS

  • Mini Kit SDS
  • Midi Kit SDS
  • Maxi Kit SDS

FAQ 요약

• 원심분리 속도: 고정 속도 원심분리기 사용 가능하나 수율 감소 가능
• 온도: 모든 원심분리 단계는 실온에서 수행
• Elution 부피 조정: 부피를 늘리면 수율 증가, 농도 감소
• Dry spin 누락 시: Wash Solution A 오염 가능
• 두 번째 엘루션: 가능하나 첫 번째보다 적은 부피 권장
• RNA 수율이 낮을 경우: 시료량 증가로 개선 가능
• A260/280 비율: 1.0–1.6은 정상 범위
• Elution Buffer 호환성: 고염, EDTA, 계면활성제 포함 시 주의
• Exosome 보관: -80°C에서 보관, 반복 동결 해동 피할 것

참고 문헌

• Scientific Reports (2025): Altered expression profile of plasma exosomal microRNAs in exclusive electronic cigarette adult users
• Journal of Experimental & Clinical Cancer Research (2023): Exploring circular MET RNA as a potential biomarker in tumors exhibiting high MET activity
• Cureus (2023): Methodology for Isolation of miRNA From the Serum of Women Investigated for Pre-eclampsia

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