Thermo Fisher Scientific Pierce Protein Refolding Kit

Thermo Fisher Scientific Pierce Protein Refolding Kit

Thermo Scientific™ Pierce™ Protein Refolding Kit은 포함체에서 변성 및 용해된 재조합 단백질의 최적 리폴딩 버퍼 조건을 결정하기 위한 고순도 시약과 상세한 매뉴얼을 제공합니다. 매트릭스 전략을 활용하여 실험 효율을 높이고, 불필요한 재실험을 최소화합니다.

주요 특징

• 강력한 성능: 일반적으로 가장 유용한 폴딩 버퍼 조합만을 포함하여 실험 효율 향상
• 편리한 매트릭스 설계: 3단계 매트릭스 구조로 데이터 해석 용이 및 2차 최적화 최소화
• 유연한 구성: 목표 단백질 특성에 맞게 매트릭스 조건 조정 가능
• 고순도 시약: 일관된 결과를 보장하는 엄격한 품질 기준 충족

제품 설명

이 키트는 변성된 재조합 단백질의 구조와 기능을 회복시키기 위한 최적의 버퍼 조건을 결정하는 데 필요한 모든 시약과 전략을 포함하고 있습니다.
9개의 기본 리폴딩 버퍼는 강한 및 약한 변성 조건을 포함한 다양한 조합으로 단백질 응집을 억제합니다.
첨가제는 단백질 특성에 따라 추가 매트릭스 요인으로 사용되며, 3단계 농도 수준에서 평가되어 한 번의 실험으로 넓은 조건 범위를 탐색할 수 있습니다.
조정 가능한 매트릭스 설계로 시료 낭비를 줄이고 리폴딩 효율을 극대화합니다.
또한 포함체의 분리, 용해, 정제, 리폴딩 조건 최적화 및 수율 분석 방법이 포함된 Refolding Guide가 제공됩니다.

Methods (예시)

라이소자임을 8M GdnHCl, 10 mM DTT, 50 mM Tris (pH 8.0) 조건에서 4°C에서 변성시켰습니다. 리폴딩 버퍼에는 GSH, GSSG, DTT가 매트릭스 구성에 따라 첨가되었으며, DTT 제거 후 단백질을 리폴딩 버퍼에 첨가하여 18시간 동안 4°C에서 반응시켰습니다. 리폴딩 수율은 EnzChek™ Lysozyme Assay Kit로 측정되었습니다.

Results and Discussion

포함체 단백질은 강한 변성제(GdnHCl 등)로 완전히 변성 후, 변성제 농도를 점차 낮추며 리폴딩 버퍼로 전환됩니다.
최적 조건에서는 1 mg/mL 이상의 농도에서도 안정적인 리폴딩이 가능하지만, 비최적 조건에서는 단백질 응집이 발생하여 수율이 저하됩니다.
리폴딩 과정에서 단백질 농도, 변성제 농도, pH, 온도, 산화환원 환경 등이 중요한 인자로 작용합니다.
라이소자임의 경우, DTT 존재 시 리폴딩이 억제되었으며, 최적 조건(1.4M GdnHCl, 0M L-arginine, 2 mM GSH : 0.4 mM GSSG)에서 90% 이상의 리폴딩 효율을 달성했습니다.

사양