Invitrogen™

Apo-BrdU Apoptosis Detection Kit

APO-BRDU™ 키트는 유세포분석으로 자가사멸 세포를 검출하기 위해 DNA 파손 및 총 세포 DNA 라벨링을 위한 2-색상 염색 방법입니다. 이 키트에는자세히 알아보기

APO-BRDU™ 키트는 유세포분석으로 자가사멸 세포를 검출하기 위해 DNA 파손 및 총 세포 DNA 라벨링을 위한 2-색상 염색 방법입니다. 이 키트에는 시약 성능 평가를 위한 양성/음성 대조 세포를 비롯하여 세포자멸사를 측정하는데 필요한 설명 및 시약, 검사의 개별 단계 진행을 위한 세척, 반응 및 린스용 완충액, TdT(말단 디옥시뉴클레오티딜 전이효소), Br-dUTP(브로모디옥시우리딘 3인산염), DNA 파손 라벨링을 위한 플루오레세인 라벨링 항BrdU 항체, 전체 DNA의 대조 염색을 위한 프로피듐 요오드화물/RNase A 용액 등이 들어 있습니다.

가장 쉽게 측정할 수 있는 자가사멸 세포의 특징 중 하나는 세포 뉴클레아제에 의한 유전체 DNA의 파괴입니다. 이 DNA 절편은 자가사멸 세포에서 추출할 수 있으며 아가로스 젤 전기영동으로 DNA를 분석하면 DNA 사다리형 밴드가 나타납니다. 대부분 온전한 형태로 남아 있는 비-자가사멸 세포의 DNA는 전기영동 과정에서 아가로스 젤 위에 이 사다리형 밴드가 나타나지 않습니다. 자가사멸 세포에 나타나는 DNA 절편의 대다수에서 DNA 내에 많은 수의 3-수산기 말단이 나타납니다. 이러한 속성을 이용하여 Br-dUTP(브롬화 디옥시우리딘 3인산염 뉴클레오티드)를 가진 3-수산기 말단을 라벨링하여 자가사멸 세포를 식별할 수 있습니다. TdT(말단 디옥시뉴클레오티딜 전이효소)는 평활, 함몰 또는 돌출 말단을 가진 이중 또는 단일 가닥 DNA의 3-수산기 말단에 템플릿 독립적으로 디옥시리보뉴클레오시드 3인산염의 추가를 촉진합니다. 이러한 부위의 상당수가 자가사멸 세포에서 발견되며 APO-BRDU™ 키트에서 이용하는 방법은 이를 기반으로 합니다. 최근 연구에서 플루오레세인, 비오틴 또는 디곡시게닌과 같은 큰 리간드에 결합되는 디옥시뉴클레오티드 3인산염보다 Br-dUTP가 자가사멸 세포의 게놈에 더 쉽게 결합된다는 사실이 확인되었습니다. Br-dUTP 부위가 플루오레세인으로 라벨링된 항BrdU 단클론항체에 의해 식별되는 경우 결합도가 높을수록 유세포분석 신호가 더 밝게 나타납니다. 비-자가사멸 세포는 노출된 3-수산기 DNA 말단이 결핍되어 많은 양의 Br-dUTP와 결합하지 않습니다.

70%(v/v) 에탄올에 약 1x106의 세포가 들어 있는 5mL 양성 및 5mL 음성 대조 세포 부유액을 비롯한 전체 60 세포 부유액 처리를 위한 충분한 시약이 제공됩니다.

사양

수량1 kit

형식Kit

제품 유형Apoptosis Detection Kit

용도(애플리케이션)Flow Cytometry

용도(장비)Fluorescence Microscope, Flow Cytometer

Unit SizeEach