Thermo Fisher Scientific Apo-BrdU Apoptosis Detection Kit

Invitrogen™ Apo-BrdU Apoptosis Detection Kit

APO-BRDU™ 키트는 유세포분석(Flow Cytometry)을 통해 자가사멸 세포를 검출하기 위한 2-색상 염색 방법을 제공합니다. DNA 파손 및 총 세포 DNA 라벨링을 동시에 수행할 수 있습니다.

제품 개요

이 키트에는 시약 성능 평가를 위한 양성/음성 대조 세포를 비롯하여, 세포자멸사 측정에 필요한 시약과 설명서가 포함되어 있습니다. 또한 세척, 반응 및 린스용 완충액, TdT(말단 디옥시뉴클레오티딜 전이효소), Br-dUTP(브로모디옥시우리딘 3인산염), 플루오레세인 라벨 항BrdU 항체, 그리고 전체 DNA 대조 염색용 프로피듐 요오드화물/RNase A 용액이 포함되어 있습니다.

작동 원리

자가사멸 세포의 주요 특징 중 하나는 세포 뉴클레아제에 의한 유전체 DNA 절단입니다. 이러한 절편은 자가사멸 세포에서 추출 시 아가로스 젤 전기영동에서 DNA 사다리형 밴드로 관찰됩니다.
비-자가사멸 세포의 DNA는 이러한 밴드를 형성하지 않습니다. 자가사멸 세포의 DNA는 다수의 3'-수산기 말단을 가지며, 이 부위를 Br-dUTP로 라벨링하여 식별할 수 있습니다.

TdT 효소는 이중 또는 단일 가닥 DNA의 3'-수산기 말단에 디옥시리보뉴클레오티드 3인산염을 추가하는 역할을 합니다. APO-BRDU™ 키트는 이러한 반응을 이용하여 자가사멸 세포를 검출합니다.

연구 결과, Br-dUTP는 플루오레세인, 비오틴 또는 디곡시게닌 등의 큰 리간드에 결합된 뉴클레오티드보다 자가사멸 세포 게놈에 더 쉽게 결합함이 확인되었습니다.
Br-dUTP 부위가 플루오레세인으로 라벨링된 항BrdU 단클론 항체에 의해 식별되면, 결합도가 높을수록 유세포분석 신호가 더 밝게 나타납니다.
비-자가사멸 세포는 노출된 3'-수산기 DNA 말단이 부족하여 Br-dUTP 결합이 거의 일어나지 않습니다.

구성 및 용량

• 약 1×10⁶ 세포가 포함된 5 mL 양성 대조 세포 부유액
• 약 1×10⁶ 세포가 포함된 5 mL 음성 대조 세포 부유액
• 총 60개 세포 부유액 처리를 위한 충분한 시약 제공
• 70% (v/v) 에탄올 보존 상태

사양